HifectinII真核轉(zhuǎn)染試劑      C1505

常溫運(yùn)輸，4 oC 1年穩(wěn)定。

HiGene 細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑       C1506

常溫運(yùn)輸，4 oC 1年穩(wěn)定。

HiGene 在體轉(zhuǎn)染試劑       C1507    

常溫運(yùn)輸，4 oC 1年穩(wěn)定。

HiGene II 細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑     C1508    

常溫運(yùn)輸，4 oC 1年穩(wěn)定。

HEK293（T）轉(zhuǎn)染試劑        C1512

常溫運(yùn)輸，4 oC 1年穩(wěn)定。

Hifectin?通用型轉(zhuǎn)染試劑    AP0001

常溫運(yùn)輸，4 oC 1年穩(wěn)定。

描述：HiGene是經(jīng)過特殊交聯(lián)修飾的新一代陽離子聚合物，其高密度陽離子基團(tuán)與帶負(fù)電的核酸結(jié)合形成致密的納米復(fù)合物，通過內(nèi)吞入胞。在細(xì)胞內(nèi)HiGene有效緩沖內(nèi)吞小體的pH，保護(hù)核酸免受降解，并高效介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)運(yùn)到胞漿胞核表達(dá)。HiGene有血清轉(zhuǎn)染效率更高，并允許細(xì)胞在鋪板時(shí)或鋪板后立即轉(zhuǎn)染，其卓越的in vitro和in vivo轉(zhuǎn)染能力堪比jetPEI、Lipofectamine 2000、ExGen 500、FuGENE、Polyfect、SuperFect等轉(zhuǎn)染試劑。HiGene是廣譜轉(zhuǎn)染試劑，可轉(zhuǎn)染的細(xì)胞包括A497,A549, BHK, Caco-2, C-26, C2C12, C3H/10T, CHO, COS1, COS7, Sf9, HeLa, HEK293, HT-29, MCF7, NIH3T3, Jurkat, K562, RAW264.7, THP1, U937, PC12, L929, SHY-5Y, Vero,原代神經(jīng)元、原代肝細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、人牛血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞、人胚胎干細(xì)胞等。HiGene高效轉(zhuǎn)染siRNA或寡聚核苷酸，并有優(yōu)異的整體動物轉(zhuǎn)染能力，介導(dǎo)基因在心肺腎肝脾等各種組織高效表達(dá)。

特征：

2  有血清轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染前后可不更換培養(yǎng)基

2  細(xì)胞鋪板時(shí)立即轉(zhuǎn)染，節(jié)省時(shí)間

2  媲美Lipofectamine 2000, jetPEI, FuGENE

2  高效轉(zhuǎn)染siRNA、DNA、寡聚核苷酸

2  in vitro轉(zhuǎn)染細(xì)胞譜廣，包括各種原代細(xì)胞和神經(jīng)元

2  in vivo動物轉(zhuǎn)染，心肺腎肝脾等高效表達(dá)

自備試劑：無菌150mM NaCl即0.9%生理鹽水或無菌蒸餾水或PBS緩沖液，用于離體細(xì)胞轉(zhuǎn)染制備轉(zhuǎn)染混合物。5%無菌葡萄糖，用于離體或在體轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染混合物制備。與復(fù)合物顆粒形成有關(guān)，勿用其它緩沖液替代。

DNA、siRNA和寡聚核苷酸：建議溶于滅菌蒸餾水。質(zhì)粒DNA高純度OD260/280 ~1.8，無內(nèi)毒素?？捎脙?nèi)毒素清除劑(#D1501)清除內(nèi)毒素。寡聚核苷酸和用于RNA干擾(siRNA)的核苷酸，可單獨(dú)或與質(zhì)粒DNA共轉(zhuǎn)染，但必須使用經(jīng)HPLC或凝膠洗脫純化去除雜鏈的高純度片段。siRNA和寡聚核苷酸與DNA轉(zhuǎn)染及優(yōu)化操作相似，但對其用量進(jìn)行細(xì)致的優(yōu)化很重要。

細(xì)胞準(zhǔn)備（重要!）

接種細(xì)胞數(shù)：參見附表細(xì)胞計(jì)數(shù)接種。培養(yǎng)時(shí)間：轉(zhuǎn)染前應(yīng)培養(yǎng)~24h，使之處于分裂和旺盛生長期。細(xì)胞密度與轉(zhuǎn)染時(shí)機(jī)：培養(yǎng)~24h后，細(xì)胞覆蓋培養(yǎng)皿表面積的70~90%時(shí)為轉(zhuǎn)染最佳時(shí)機(jī)。低密度細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率并不低，但總細(xì)胞數(shù)少因而蛋白表達(dá)總量也不會很高。在較高細(xì)胞密度時(shí)轉(zhuǎn)染較好，但100%長滿的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率很低，因此接種細(xì)胞要均勻，以減少因局部緊密接觸而致生長抑制的難轉(zhuǎn)染細(xì)胞，否則最好重頭接種細(xì)胞。HiGene允許在細(xì)胞鋪板時(shí)或鋪板后立即轉(zhuǎn)染，效果與貼壁后轉(zhuǎn)染相似，但大大節(jié)省時(shí)間和勞動，適合高通量篩選。甚至一些難轉(zhuǎn)染細(xì)胞也可嘗試此即時(shí)轉(zhuǎn)染方法。血清和培養(yǎng)基：HiGene具有卓越的轉(zhuǎn)染能力，血清和抗生素不影響轉(zhuǎn)染，在10~30%血清培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染表達(dá)效率更高。轉(zhuǎn)染混合物體積為培養(yǎng)基的1/10，參見表第5欄。如果培養(yǎng)基未明顯變黃，轉(zhuǎn)染前可不更換。如轉(zhuǎn)染結(jié)果滿意，轉(zhuǎn)染后無需更換培養(yǎng)基。但轉(zhuǎn)染混合物稀釋了培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染4~8小時(shí)后換培養(yǎng)基會可進(jìn)一步增加轉(zhuǎn)染效率。