細(xì)胞貼壁粘附劑（Cell adherent reagent, 200-500X）  C1010

描述：一種新型化合物，用之室溫處理培養(yǎng)瓶30分鐘，能夠使原代或傳代培養(yǎng)細(xì)胞的粘附貼壁能力顯著增加，處理效果優(yōu)于使用多聚賴氨酸和膠原蛋白，對(duì)絕大多細(xì)胞類型均有明顯效果，本產(chǎn)品無細(xì)胞毒性，不影響后續(xù)免疫熒光組化和酶學(xué)測(cè)定等實(shí)驗(yàn)，適用于各種原代細(xì)胞，如乳鼠腦神經(jīng)元，易漂浮的傳代細(xì)胞，如PC12和HEK293細(xì)胞，也適用于藥物處理易漂浮細(xì)胞；不僅能夠明顯改善細(xì)胞生長狀態(tài)、增加細(xì)胞數(shù)量，還可以使細(xì)胞容易耐受洗滌、換液、藥物處理造成的脫落。對(duì)于生長在處理過的瓶皿中的細(xì)胞，使用細(xì)胞貼壁粘附劑可使細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率顯著增加2-5倍。

用途及特征：

1.         各種原代細(xì)胞如腦神元的貼壁培養(yǎng)；

2.         易漂浮的傳代細(xì)胞系如PC12和HEK293細(xì)胞；

3.         能夠防止洗滌、換液、藥物處理導(dǎo)致的細(xì)胞漂浮脫落問題；

4.         能夠使真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率增加2-5倍；

5.         無細(xì)胞毒性，不影響后續(xù)免疫熒光組化和酶學(xué)測(cè)定。

 

規(guī)格：1 ml，200-500X濃縮液，溶于過濾除菌生理鹽水。

儲(chǔ)存：常溫運(yùn)輸，4oC保存1年。

 

使用方法：

1.         使用時(shí)，將此濃縮溶液以1:200-1:500比例稀釋于滅菌純水或生理鹽水（0.9% NaCl）或PBS緩沖液中，制備成工作溶液。注意：不同細(xì)胞對(duì)貼壁粘附劑的敏感度不同，通常粘附劑處理后的器皿培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)及生長狀態(tài)均應(yīng)正常，如果細(xì)胞比較敏感，選用高濃度的細(xì)胞貼壁粘附劑會(huì)使細(xì)胞過度粘著，有可能出現(xiàn)細(xì)胞褶皺、偽足伸出不暢或細(xì)胞移動(dòng)分散不佳等現(xiàn)象，此時(shí)應(yīng)將其進(jìn)行高比例稀釋，避免出現(xiàn)以上情況。

2.         加入新鮮工作液使其完全覆蓋培養(yǎng)瓶皿表面。室溫或37 oC孵育30 min，偶爾搖動(dòng)。

3.         完全棄去瓶皿中的液體。可用滅菌蒸餾水或滅菌生理鹽水或PBS緩沖液等洗滌瓶皿一次，但也可不洗滌而盡量甩干后直接鋪種細(xì)胞。經(jīng)過處理的瓶皿可存放數(shù)天后使用。

4.         甩干瓶皿即可用于鋪種細(xì)胞，增加多種原代培養(yǎng)細(xì)胞如神經(jīng)元細(xì)胞的貼壁能力。

 

說明：

1.         使用本品后，某些類型的細(xì)胞如果貼壁過緊，消化時(shí)可加大胰酶用量或延長消化時(shí)間。

2.         該試劑安全，無毒性。

附表：各種瓶皿需要細(xì)胞貼壁粘附劑的量

培養(yǎng)皿/瓶	面積 cm2	需用Cell adherent reagent (μl)	稀釋后的體積 (μl)	可處理的孔或瓶皿總數(shù)
96-well 培養(yǎng)板	0.3 /well	0.2 μl	40 μl	5000 孔
24-well 培養(yǎng)板	2 /well	0. 5 μl	100 μl	2000 孔
12-well 培養(yǎng)板	4 /well	1 μl	200 μl	1000 孔
6-well 培養(yǎng)板	10 /well	2.5 μl	500 μl	500 孔
35-mm 培養(yǎng)皿 10 cm2 培養(yǎng)瓶	10 /dish or flask	2.5 μl	500 μl	500 瓶皿
60-mm 培養(yǎng)皿 25 cm2 培養(yǎng)瓶	25 /dish or flask	5 μl	1 ml	200 瓶皿
10-cm 培養(yǎng)皿 75 cm2 培養(yǎng)瓶	75 /dish or flask	10 μl	2 ml	100 瓶皿