普利萊-Super-ECL-Plus超敏發(fā)光液
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Super ECL Plus超敏發(fā)光液 (機器兼用)P1050 p1060
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
P1050-25 | Super ECL Plus超敏發(fā)光液(強) | 25mL | 190元 |
P1050-100 | Super ECL Plus超敏發(fā)光液(強) | 100mL | 590元 |
P1050-250 | Super ECL Plus超敏發(fā)光液(強) | 250mL | 990元 |
P1050-500 | Super ECL Plus超敏發(fā)光液(強) | 500mL | 1560元 |
描述:SuperECL Plus超敏發(fā)光液可用于直接或間接檢測與辣根過氧化物酶HRP關聯(lián)的蛋白或核酸底物。這一獨特的發(fā)光底物系統(tǒng)是目前最靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑,具有極高靈敏度和高信噪比,更加節(jié)省抗體用量,可檢測10-100 fg抗原,適于各類全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng);其發(fā)光迅速,熒光可持續(xù)長達12小時以上,特別適用于痕量蛋白或核酸檢測。同時該試劑允許使用更高的抗體稀釋倍數,極其節(jié)省抗體。
用途:適于全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)的HRP標記抗體的Western Blot和HRP標記探針的核酸雜交。
儲存:4 oC密封避光保存九個月。
安全性:無特殊毒性,按普通化學品處理。
使用方法:
1. 常規(guī)電泳、轉膜、HRP標記抗體或核酸探針孵育、洗膜。注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。核酸雜交膜用HRP標記探針雜交,洗膜。
2. 洗滌膜上的HRP標記二抗時,配制新鮮發(fā)光工作液:分別取等體積的溶液A和B混合,放置使之升到室溫否則會減弱熒光強度。建議立即使用工作液,室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。
3. 用鑷子取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入并與發(fā)光工作液(0.125ml發(fā)光工作液/cm2膜)充分接觸。準備立即使用全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。孵育時間過長不會增加靈敏度,有時還會導致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質是酶促反應,使用過少的發(fā)光工作液不利于反應進行,也會導致膜上條帶曝光不均,明顯降低靈敏度。為達節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。
4. 用鑷子夾起膜,搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。
5. 全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。
注意事項:
1. 步驟1-5可在日光燈下操作;但發(fā)光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 蛋白過量,將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系。
3. 發(fā)光工作液孵育約1分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見,低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。肉眼不可見的熒光實際上可持續(xù)數小時并使全自動化學發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。如果曝光后條帶不佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL發(fā)光。
4. 由于超敏發(fā)光液極其靈敏,強烈推薦大多數進口抗體起始濃度為一抗1:1000-1:4000,二抗1:2000-1:5000??贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶,導致失敗!
5. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時會淬滅熒光,應選擇高質量保鮮膜,例如“克林萊”牌子保鮮膜。
6. 使用肉眼可見的熒光-放射自顯影曝光標簽(#P2010)可幫助確定膠片上條帶的準確位置和大小。
7. NaN3能抑制HRP活性,回收第二抗體應避免使用NaN3,如必需使用勿超過0.01%。
發(fā)表英文論文時可供參考的試劑材料書寫方式:
SuperEnhanced chemiluminescence detection reagents were purchased from Applygen Technologies Inc. (Beijing, China);
The protein bands were visualized by enhanced chemiluminescence detection reagents (Applygen Technologies Inc., Beijing, China);
The blots were washed and then developed by use of a SuperEnhanced chemiluminescence detection kit (Applygen Technologies Inc., Beijing, China), The protein bands were visualized after exposure of the membranes to Kodak X-ray film.
發(fā)表中文論文時可標明 (SuperECL Plus超敏發(fā)光液購自北京普利萊基因技術公司)。
以下僅僅列舉數篇使用北京普利萊基因技術公司SuperECL Plus超敏發(fā)光液的SCI研究論文:
1. Xia R, Wang J, Liu C, et al. The Plant Cell, 2006, 18: 85-103.
2. He J, Jiang H, Tansey JT, et al. Biochimica Biophysica Acta 2006, 1761: 247-255.
3. Zhang L, Chen J, Ke Y, et al. Oncology Reports, 2005, 14: 1615-1619.
4. Wang H, Qian H, Yu J, et al. Cancer Biology & Therapy 2006, 5: 380-385.
5. Luo M, Shen X, Zhang Y, et al. Cancer Research, 2006, 66: 11690-11699.
6. Jiang H, He J, Tang C, et al. Biochimica Biophysica Acta, 2007, 1771: 66–74
7. Ren T, He J, Jiang H, et al. Journal of Molecular Endocrinology. 2006, 37: 175-183.
8. Qian L, Zhang Z, Shi M, et al. Journal Histochemistry and Cell Biology. 2006, 126: 593-601
9. Pan S, Jiang W, Wu Y, et al. Journal Basic Research in Cardiology. 2006, 101: 193-203
10. Wang C and Liu T. Functional Plant Biology, 2006, 33: 697-702.
11. Du X, Hu H, Lin D, et al. Journal of Molecular Medcine, 2007, online, DOI 10.1007/s00109-007-0159-4