大族激光科技產(chǎn)業(yè)集團(tuán)股份有限公司
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酶標(biāo)板封閉前的清洗-大族等離子清洗機(jī)
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酶標(biāo)板封閉前的清洗
酶標(biāo)板或者又叫做一次性(細(xì)胞細(xì)菌)培養(yǎng)板,基本都是透明顏色,PS(聚苯乙烯)材料做成,一般根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同,分為高結(jié)合力,中結(jié)合力和氨基化的。
高結(jié)合力
此種酶標(biāo)板,表面經(jīng)處理后,其蛋白結(jié)合能力大大增強(qiáng),可達(dá)300-400ng lgG/cm2主要結(jié)合的蛋白分子量10kD。使用該類酶標(biāo)板可提高敏感性,并可相對(duì)減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。
2)中結(jié)合力
此類酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵被動(dòng)與蛋白結(jié)合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結(jié)合能力為200~300ng 1gG/cm2,由于該類酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異交叉反應(yīng)。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
3)氨基化
這種酶標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標(biāo)板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分
子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價(jià)的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團(tuán)發(fā)生作用。
等離子體清洗可以對(duì)酶標(biāo)板材料的整體、局部或復(fù)雜結(jié)構(gòu)部分進(jìn)行清洗;在完成清洗去污的同時(shí),還可以改善材料本身的表面性能。如提高表面的潤(rùn)濕性能、改善膜的黏著力等,這在酶標(biāo)板的加工制造過程中是非常重要的聚苯乙烯酶標(biāo)板經(jīng)等離子接枝處理后,能在基體表面引入醛基、氨基、環(huán)氧基等活性官能團(tuán),提高基體表面的浸潤(rùn)性、表面能,使酶牢牢地固定在載體上面,提高酶的固定性。經(jīng)達(dá)因筆測(cè)試,PS材料處理前是38達(dá)因左右,處理后是72達(dá)因左右,表面張力值得到極大的改善。