材料及方法

1、試驗(yàn)材料

1.1、受試物

隨機(jī)抽取市場(chǎng)上皮膚黏膜消毒劑包括含季銨鹽類的女性洗液和含醋酸氯己定及碘伏類皮膚消毒液共35種；還抽取一次性衛(wèi)生用品包括衛(wèi)生巾和安全套共37種。衛(wèi)生用品試驗(yàn)時(shí)將3g受試物剪成碎片，浸泡于30ml滅菌生理鹽水中，攪拌后密封于容器中，置于37℃溫箱中24h取浸泡液備用。

生巾和安全套共37種。衛(wèi)生用品試驗(yàn)時(shí)將3g受試物剪成碎片，浸泡于30ml滅菌生理鹽水中，攪拌后密封于容器中，置于37℃溫箱中24h取浸泡液備用。

1.2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選擇體重20~25kg健康雌性新西蘭種家兔，每種受試物用6只，由北京通利實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)提供，動(dòng)物合格證號(hào)為京動(dòng)許字(2000)第024號(hào)；另取體重200~260gWistar種雌性大鼠，每種受試物用18只，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物合格證號(hào)為京動(dòng)許字9900L。

2、方法

2.1、家兔陰道黏膜刺激試驗(yàn)

將6只家兔隨機(jī)分為受試物組和陰性對(duì)照組，每組3只。將受試物2ml用導(dǎo)尿管注入陰道內(nèi)4~5cm處，陰性對(duì)照組注入等量滅菌生理鹽水。染毒24h后采用氣栓法處死動(dòng)物，剖腹取出完整陰道，縱向切開，肉眼觀察病變。取組織用福爾馬林液固定，進(jìn)行常規(guī)病理制片﹑染色、鏡檢。對(duì)家兔陰道黏膜的刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分及刺激強(qiáng)度分級(jí)。

2.2、大鼠陰道黏膜刺激試驗(yàn)

將18只大鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、賦形劑對(duì)照組和受試物組，每組6只。受試物組用適當(dāng)大小的滅菌棉條浸受試物浸泡液，賦形劑對(duì)照組浸以滅菌生理鹽水，分別置于動(dòng)物陰道內(nèi)，陰性對(duì)照組不處理。與陰道黏膜接觸4h24h后頸椎脫臼處死動(dòng)物取出局部陰道組織，肉眼觀察病變，對(duì)大鼠陰道黏膜的刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分及刺激強(qiáng)度分級(jí)。

2.3、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

肉眼觀察，積分為零者為無陽性反應(yīng)；有積分者均為陽性反應(yīng)。病理組織學(xué)檢查，各種病變類型積分零者為無病變；有積分者均為有病變。

結(jié)果

1.1、兩種動(dòng)物陰道黏膜剌激試驗(yàn)結(jié)果比較

結(jié)果表明，黏膜消毒劑對(duì)家兔與大鼠陰道黏膜刺激試驗(yàn)陽性反應(yīng)檢出率分別為563%和15.8%(表1)，經(jīng)檢驗(yàn)，二者在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異有顯著性(P<005)。陽性反應(yīng)受試物包括11種植物提取物，8種中藥類消毒劑，5種狐類消毒劑，3種含碘消毒劑，3種含氯消毒劑，1種季銨鹽類消毒劑，1種醇類消毒劑。一次性衛(wèi)生用品陰道黏膜刺激試驗(yàn)檢出率，兩種動(dòng)物均為0。

結(jié)果表明，黏膜消毒劑對(duì)兩種動(dòng)物陰道黏膜刺激反應(yīng)強(qiáng)度主要為無刺激性和極輕刺激性；一次性衛(wèi)生用品對(duì)家兔或大鼠陰道黏膜刺激強(qiáng)度分級(jí)均為無刺激性(表2)光鏡陰道黏膜組織病理檢查病理。

改變檢出率較高，40種產(chǎn)品中僅1種未見病理改變，積分為0有97.5%檢出病理改變(表略)。黏膜消毒劑對(duì)家兔陰道黏膜為極輕刺激性結(jié)果占37.5%，與大鼠比較差異具有顯著性。

1.2、家兔陰道黏膜刺激試驗(yàn)各種病變類型比較

病理檢查結(jié)果證明，受試物引起動(dòng)物陰道黏膜病理變化頻率從多到少依次為水腫、充血、白細(xì)胞浸潤和上皮組織病變。受試物對(duì)陰道黏膜刺激主要表現(xiàn)為黏膜下水腫和血管擴(kuò)張，并充滿大量紅細(xì)胞，少部分受試物引起嗜中性白細(xì)胞極少至中度浸潤，個(gè)別受試物引起黏膜上皮節(jié)段性增生，未見陰道上皮組織出現(xiàn)細(xì)胞壞死改變(表3)。

引起動(dòng)物陰道組織病理改變的皮膚黏膜消毒劑有：中藥類5種，肌類消毒劑5種，植物提取物4種，季銨鹽類1種，含碘消毒劑1種。發(fā)生充血、水腫、炎細(xì)胞浸潤及正常陰道組織。

討論

黏膜消毒劑和一次性衛(wèi)生用品均為婦女常用的.衛(wèi)生用品，因其產(chǎn)品成分、工藝及衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)的不同，存在質(zhì)量差異，可能對(duì)黏膜產(chǎn)生某些不良反應(yīng)。本研究通過對(duì)黏膜消毒劑和一次性衛(wèi)生用品對(duì)大鼠和家兔陰道黏膜刺激試驗(yàn)結(jié)果的比較分析發(fā)現(xiàn)，大鼠和家兔陰道黏膜肉眼觀察陽性率分別為158%和563%，黏膜消毒劑陽性反應(yīng)率明顯高于衛(wèi)生用品；結(jié)果提示家兔陰道黏膜對(duì)外界刺激反應(yīng)可能較為敏感。

黏膜消毒劑對(duì)動(dòng)物陰道黏膜刺激強(qiáng)度分級(jí)顯示，大鼠全部為無刺激性；家兔對(duì)于黏膜消毒劑敏感性較高，輕度刺激反應(yīng)率為37.5%；對(duì)相同的黏膜消毒劑反應(yīng)性大鼠明顯低于家兔，這在試驗(yàn)動(dòng)物選擇上存在重大差異。部分動(dòng)物陰道黏膜可見較明顯充血、水腫，黏膜消毒劑肉眼觀察病變檢出率明顯高于一次性衛(wèi)生用品，該結(jié)果與劉順軍等3報(bào)道基本一致。

家兔陰道黏膜病變類型主要以黏膜下水腫和血管充血為主，部分動(dòng)物伴有炎細(xì)胞浸潤，未見黏膜上皮組織壞死。2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》)中規(guī)定用家兔進(jìn)行陰道黏膜刺激試驗(yàn)方法，且增加了病理組織學(xué)檢查內(nèi)容，明顯提高了病變檢出率，能較客觀地反映受試物對(duì)組織損傷的程度及類型。說明細(xì)胞水平病理組織學(xué)檢查對(duì)評(píng)價(jià)受試物黏膜刺激毒性較為敏感。

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