博爾森-BIOESN 大鼠內凝集蛋白1(ITLN1) ELISA Kit BES2681K
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博爾森-BIOESN 大鼠內凝集蛋白1(ITLN1) ELISA Kit BES2681K

博爾森-BIOESN-大鼠內凝集蛋白1(ITLN1)-ELISA-Kit

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上海博爾森生物科技有限公司

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商品參數
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品牌 博爾森-BIOESN
規(guī)格 96T/48T
貨號 BES2681K
周期 一周左右
檢測方法 sandwich
檢測范圍 78.1-5000pg/mL
種屬 Rattus norvegicus Rat
商品介紹

大鼠內凝集蛋白1(ITLN1) ELISA Kit 

檢測原理:

博爾森生物BIOESN生產的ELISA試劑盒采用抗體夾心法:將抗某蛋白抗體包被于酶標板上,標本和標準品中的某蛋白與抗體結合,加入生物素化的抗某蛋白抗體,再加入SABC復合物與生物素抗體結合,形成免疫復合物,然后加入TMB顯色底物,顯色劑顯藍色,最后加終止液變黃色,游離的成分被洗去。在450 nm處測OD值,某蛋白濃度與OD值之間呈正比,可通過繪制標準曲線計算出標本中某蛋白的濃度。

試劑盒組分: (保存溫度4℃)

    

規(guī)格(48 T

規(guī)格(96 T

預包被酶標板

8×6

8×12

標準品

1支

1支

標準品/樣品稀釋液

10ml

15ml

生物素化檢測抗體(100×

60ul

120ul

生物素化檢測抗體稀釋液

6ml

12ml

SABC復合物

6ml

12ml

TMB顯色液(A/B

3ml

6ml

終止液

6ml

12ml

20×濃縮洗滌液 

30ml

60ml

封板膠紙

2張

4張

產品說明書

1

1

本試劑盒用于血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清液及其它生物體液。

 

標本收集與試劑準備: 

1. 血清、血漿樣本收集應使用一次性的無熱原,無內毒素試管(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝均可),血清、血漿避免使用溶血,高血脂標本,標本懸浮物應離心去除,使標本清澈透明。待測樣本應盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20-80℃)保存,避免反復凍融。

2. 洗滌液配置:用蒸餾水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的蒸餾水

3. 標準品配制:取71.5ml離心管分別標注1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,blank。從七管中分別加入標準品/樣品稀釋液200ul。在第一管中加入標準品溶液200ul,置于漩渦混合器上混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二。如此反復作對倍稀釋,從第六管中吸出200ul棄去,七管為空白對照。

4. 

5. 生物素化抗體工作液配置:使用前20分鐘,用生物素化抗體稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成工作液,根據所需用量配置,當日使用,剩余棄之。

6. TMB顯色液的配置:使用前10分鐘,將TMB顯色液A液和B液1:1混合,避光放置備用。

7. 如果您檢測的樣本中靶蛋白濃度高于標準品最高值,建議重新檢測,請根據實際情況,適當倍數稀釋(建議做預實驗,以確定稀釋倍數)。

檢測程序:

1. 加樣:空白孔加入50μl標準品/樣品稀釋液,其余孔各加入標準品或待測樣品50ul,將反應板混勻后置37℃,40分鐘。

2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,每孔加入洗液350μl,每次震蕩/浸泡1-2分鐘,向濾紙上印干。

3. 空白孔加入100ul生物素化抗體稀釋液,其余孔各加入的生物素化抗體工作液100ul混勻后置37℃,30分鐘。

4. 洗板:同上。

5. 每孔加入SABC復合物工作液100ul,混勻后置37℃,20分鐘。

6. 洗板:同上。

7. 每孔加入提前配置好的TMB混合液100ul,混勻后37 ℃暗處反應10-20分鐘(具體顯色時間根據顯色結果而定)。

8. 每孔加入100ul終止液,混勻,30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。

結果判斷與計算:

1. 所有OD值建議減除空白值后再行計算,如空白OD低于0.1,也可以直接計算。

2. 以標準品濃度作橫坐標,OD值作縱坐標,手工繪制或用軟件繪制標準曲線,根據樣品OD值計算出相應含量,再乘上稀釋倍數即可。

試劑盒性能:

1、 檢測范圍:31.2-2000pg/mL

2、 特異性:同時可檢測重組或天然的某種蛋白或抗體,不與其它細胞因子有交叉反應。

3、 重復性:板內,板間變異系數均小于10%。

注意事項

1. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,每次檢測都標準曲線。

2. 洗滌過程很關鍵,洗滌不充分將導致精確度誤差及OD值錯誤地升高,從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能 有結晶,屬于正?,F(xiàn)象,37℃水浴使結晶完全溶解后再配制洗滌液。

3. 檢測時所有試劑都要恢復到室溫,板條開封后剩余板條封好,放回袋中2 個月內用完。

4. 試劑盒使用超敏TMB溶液,若顯色過深會出現(xiàn)絮狀物,屬正常現(xiàn)象,不影響結果判讀。

5. 僅用于科研,不能用于臨床診斷!

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公司名稱 上海博爾森生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 楊柳 (QQ:3597200582)
電話 尋尃専-将尉将專専專專尉
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地址 上海市松江區(qū)
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