博爾森-BIOESN 超保真PCR Mix BES2105PCR
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上海博爾森生物科技有限公司

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品牌 博爾森-BIOESN
規(guī)格 1 ml/10ml
貨號(hào) BES2105PCR
應(yīng)用 超保真擴(kuò)增：~280倍Taq的保真性能，是載體構(gòu)建、點(diǎn)突變、NGS模板擴(kuò)增、基因合成的最佳用酶。
保存條件 長(zhǎng)期儲(chǔ)存置于-20°C以下，可保存2年，避免反復(fù)凍融；短期使用置于4°C（3個(gè)月）保存，一經(jīng)融化后請(qǐng)放置于4°C，勿再凍存。
商品介紹


RAPA HiFi DNA聚合酶其來源于高保真DNA聚合酶，并加入了Sso7d延伸結(jié)合域，能夠提高反應(yīng)速度、保真度和穩(wěn)定性。該HiFi PCR Mix為單酶制品，不含其它DNA聚合酶，具有超保真擴(kuò)增性能（~280倍Taq）、長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力、高產(chǎn)量等優(yōu)勢(shì)。RAPA HiFi DNA聚合酶在保真性方面與Q5 DNA聚合酶相似，在優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液中，RAPA HiFi PCR Mix在長(zhǎng)片段擴(kuò)增、產(chǎn)量、成功率方面要超過Q5 PCR Mix。使用該酶可輕松擴(kuò)增8kb的基因組片段，20kb的λ DNA，8kb的cDNA。RAPA HiFi DNA聚合酶具有6kb/min以上的擴(kuò)增速度。對(duì)于常規(guī)或GC含量≤ 65%的復(fù)雜模板，使用該制品可以進(jìn)行可靠的、超強(qiáng)的擴(kuò)增。對(duì)于高GC含量的模板（＞65%），添加5×Q-Solution（Cat. No.: A3002）確保最大的擴(kuò)增性能。該HiFi PCR Mix具有5'-3'的聚合酶活性、3'-5'的強(qiáng)外切酶活性，產(chǎn)物為平末端。

特征

  • 超保真擴(kuò)增：~280倍Taq的保真性能，是載體構(gòu)建、點(diǎn)突變、NGS模板擴(kuò)增、基因合成的最佳用酶。
  • 快速擴(kuò)增：具有6kb/min的擴(kuò)增能力。
  • 長(zhǎng)片段擴(kuò)增：質(zhì)粒、λ DNA 等簡(jiǎn)單模板可以有效擴(kuò)增>20 kb，基因組可以有效擴(kuò)增>8 kb，cDNA可以有效擴(kuò)增>8kb。

儲(chǔ)存

長(zhǎng)期儲(chǔ)存置于-20°C以下，可保存2年，避免反復(fù)凍融；短期使用置于4°C（3個(gè)月）保存，一經(jīng)融化后請(qǐng)放置于4°C，勿再凍存。

反應(yīng)實(shí)例

1. 長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力
分別以λDNA、human gDNA、human cDNA為模板，使用RAPA HIFI PCR Mix進(jìn)行擴(kuò)增，循環(huán)數(shù)統(tǒng)一為28 cycles，結(jié)果如上圖所示，對(duì)于不同種類DNA模板的長(zhǎng)片段靶基因，RAPA HIFI PCR Mix均有良好的擴(kuò)增性能。

常見問題及解決方案：

無擴(kuò)增或產(chǎn)量低循環(huán)數(shù)
退火溫度
模板DNA純度和用量
延伸時(shí)間
引物用量
引物設(shè)計(jì)		增加循環(huán)數(shù)至35~40cycles
以2℃為單位降低退火溫度
使用高純度的模板DNA，使用合適的模板量。
適當(dāng)增加延伸時(shí)間
在0.1μM~0.5μM之間選取合適的引物量
重新設(shè)計(jì)優(yōu)化引物
出現(xiàn)雜帶或Smear退火溫度
引物濃度
循環(huán)數(shù)
模板DNA使用量
引物

以2℃為單位提高退火溫度
降低引物濃度至0.2μM
降低循環(huán)數(shù)至25~28cycles
使用合適的模板量，不要過多使用
重新設(shè)計(jì)優(yōu)化引物



聯(lián)系方式
公司名稱 上海博爾森生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 楊柳 （QQ：3597200582）
電話 䀍䀑䀋-䀌䀓䀌䀒䀋䀒䀒䀓
手機(jī) 䀋䀐䀋䀌䀌䀍䀌䀋䀋䀔䀑
網(wǎng)址 https://www.bioesn.net/
地址 上海市松江區(qū)
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