博爾森-BIOESN RAPA HiFi DNA聚合酶 BES2002DP
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博爾森-BIOESN-RAPA-HiFi-DNA聚合酶

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上海博爾森生物科技有限公司

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品牌 博爾森-BIOESN
規(guī)格 500U
貨號 BES2002DP
應(yīng)用 是載體構(gòu)建、點(diǎn)突變、NGS模板擴(kuò)增、基因合成的最佳用酶。
保存條件 -20°C可保存2年
商品介紹


RAPA HiFi DNA聚合酶，其來源于高保真DNA聚合酶，并加入了增強(qiáng)的延伸結(jié)構(gòu)，使其具有超保真性能（~280倍Taq）、長片段擴(kuò)增能力、高產(chǎn)量。長片段擴(kuò)增能力，使用該酶可輕松擴(kuò)增8kb的基因組DNA、20kb的λDNA、8kb的cDNA。該酶具有6kb/min以上的延伸速度。該酶具有5’-3’的聚合酶活性、強(qiáng)3’-5’的外切酶活性，產(chǎn)物為平末端。

主要特征

  • 超保真擴(kuò)增：~280倍Taq的保真性能，是載體構(gòu)建、點(diǎn)突變、NGS模板擴(kuò)增、基因合成的最佳用酶。
  • 快速擴(kuò)增：具有6kb/min的擴(kuò)增能力。
  • 長片段擴(kuò)增：質(zhì)粒、λDNA 等簡單模板可以有效擴(kuò)增>20 kb，基因組可以有效擴(kuò)增>8 kb，cDNA可以有效擴(kuò)增>8kb。

組分

組分名稱500U
RAPA HiFi DNA Polymerase(5 U/μl)100 μl
2xRAPA HiFi Buffer1 ml×5

單位定義

一個(gè)活力單位即在在74°C條件下，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。

儲存

長期儲存置于-20°C以下，可保存2年；短期使用置于4°C（3個(gè)月）保存。

使用方法

1.按下表配制反應(yīng)體系并混合均勻：
2xRAPA HiFi Buffer                                 12.5 μl
RAPA HiFi DNA Polymerase(5 U/μl)      0.25 μl
dNTP Mixture (10 mM each)                  0.25 μl
上游引物(10 μM)                                         1 μl
下游引物(10 μM)                                         1 μl
*模板DNA                                          1-250 ng
ddH2O                                           up to 25 μl
*模板DNA用量參數(shù)(25 μl反應(yīng)體系,目的片段≤20kb)
     5-250 ng Genomic DNA
     0.1-10 ng Plasmid DNA
     1-2 μl cDNA from RT reaction
2. PCR擴(kuò)增循環(huán)參數(shù)
（1）擴(kuò)增片段<5kb時(shí)采用如下程序
循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間
1st Cycle95°C1min
25-35 Cyclese95°C30s
50~60°C30s
72°C6kb/min
Last Cycle72°C2min
（2）擴(kuò)增片段>5kb時(shí)采用如下程序
循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間
1st Cycle95°C1min
25-35 Cyclese95°C30s
50~60°C30s
72°C2-3kb/min
Last Cycle72°C2min
3.注意事項(xiàng)
（1）當(dāng)模板GC含量>65%時(shí)，請?zhí)砑?×Q-Solution（Cat. No.: A3002）。
（2）當(dāng)擴(kuò)增片段<1kb時(shí)，延伸時(shí)間可直接使用15s，當(dāng)擴(kuò)增片段>5 kb時(shí)，按照2-3 kb/min的延伸時(shí)間進(jìn)行設(shè)置，能獲得更高的產(chǎn)量。
（3）由于不同的PCR管其導(dǎo)熱性能有所不同，通常PCR采用25 μl體系可以獲得更高的產(chǎn)量。
聯(lián)系方式
公司名稱 上海博爾森生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 楊柳 （QQ：3597200582）
電話 尋尃専-将尉将專専專專尉
手機(jī) 専將専将将尋将専専尅尃
網(wǎng)址 https://www.bioesn.net/
地址 上海市松江區(qū)
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