博爾森/BIOESN T4 Quick Ligation Mix BES2079PCR
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博爾森/BIOESN T4 Quick Ligation Mix BES2079PCR

博爾森-BIOESN-T4-Quick-Ligation

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上海博爾森生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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品牌 博爾森/BIOESN
貨號 BES2079PCR
規(guī)格 50rnx
存儲方式 -20℃保存
應(yīng)用范圍 適用于PCR、qPCR以及PCR克隆；用于較長的cDNA合成等
商品介紹


產(chǎn)品概述

  本產(chǎn)品是一種即用型2 × 預(yù)混液，內(nèi)含Rapid T4 DNA Ligase、專屬連接增強(qiáng)劑和經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液，該設(shè)計(jì)簡化了建立反應(yīng)所需的步驟。該預(yù)混液可完成DNA粘性末端、平末端或單堿基突出末端的連接反應(yīng)。用本試劑盒能使大多數(shù)連接反應(yīng)在25℃條件下5 min即可達(dá)到反應(yīng)終點(diǎn)。此外，即使當(dāng)DNA量少且濃度低時仍可進(jìn)行克隆連接，為用戶節(jié)省寶貴的DNA樣品，且無需稀釋直接轉(zhuǎn)化到多種化學(xué)感受態(tài)大腸桿菌。
 產(chǎn)品內(nèi)容

組分

BES2079PCR

T4 Quick Ligation Mix

250 μL


產(chǎn)品優(yōu)勢

  • 快速：5 min即可完成連接反應(yīng)。
    兼容性強(qiáng)：可連接粘性末端、平末端、單堿基突出末端、Linker以及Adapter。
    方便快捷：2×預(yù)混液包裝，減少加樣次數(shù)，使得克隆更為高效。
實(shí)驗(yàn)案例
1.T/A 5 min快速連接
 
         
       以購買的pMD18-T載體、Taq DNA聚合酶的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物（500 bp）為T/A連接的底物；用T4 Quick Ligation Mix進(jìn)行25℃，5 min快速連接后，轉(zhuǎn)化到DH5α感受態(tài)細(xì)胞，培養(yǎng)12-16 h后，平板菌落生長狀況如圖1所示，隨機(jī)挑取15顆單克隆用載體通用引物進(jìn)行菌落PCR，后進(jìn)行瓊脂糖凝膠檢測，如圖2所示，分析上述結(jié)果可得，T4 Quick Ligation Mix對T/A連接具有優(yōu)異的連接效率。 

2. 粘性末端5 min快速連接
       
        以EcoRΙ、XbalΙ進(jìn)行雙酶切后回收得到的pET-28a載體及基因片段（2kb）作為粘性末端連接底物，用T4 Quick Ligation Mix進(jìn)行25℃，5min快速連接后，轉(zhuǎn)化到DH5α感受態(tài)細(xì)胞，培養(yǎng)12-16h后，平板菌落生長狀況如圖3所示，隨機(jī)挑取15顆單克隆用載體通用引物進(jìn)行菌落PCR，后進(jìn)行瓊脂糖凝膠檢測，如圖4所示，分析上述結(jié)果可得，T4 Quick Ligation Mix對粘性末端的連接具有優(yōu)異連接效及陽性率。

3.   T/A及平末端快速連接
        以pT7BlueT載體及插入片段（1.0 kb）作為T/A連接底物， 以平末端pUC19載體及基因片段（0.5 kb）作為平末端連接底物用從A、B公司購入的同類產(chǎn)品、T4 Quick Ligation Mix進(jìn)行25℃，5 min快速連接，后轉(zhuǎn)化到DH5α感受態(tài)細(xì)胞，在含有X-Gal、IPTG、Amp的L-瓊脂平板上培養(yǎng)，形成單菌落，并進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)并計(jì)算轉(zhuǎn)化效率。從結(jié)果中可看出英贊的T4 Quick Ligation Mix具有較高的轉(zhuǎn)化效率及連接效率。
 應(yīng)用范圍：粘性末端連接、T/A克隆、平末端連接、dsDNA切刻修復(fù)。

產(chǎn)品存儲：-20℃保存

聯(lián)系方式
公司名稱 上海博爾森生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 楊柳 （QQ：3597200582）
電話 䀍䀑䀋-䀌䀓䀌䀒䀋䀒䀒䀓
手機(jī) 䀋䀐䀋䀌䀌䀍䀌䀋䀋䀔䀑
網(wǎng)址 https://www.bioesn.net/
地址 上海市松江區(qū)
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