產(chǎn)品名稱：出血性大腸桿菌(EHEC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)

包裝：48T
分類：pcr-熒光試劑盒
用途:本產(chǎn)品僅供科研與實(shí)驗(yàn)使用，不用于臨床診斷等
目的：本試劑盒適用于檢測(cè)疑似感染者或發(fā)病動(dòng)物等組織、體液或淋巴結(jié)等標(biāo)本中禽流感病毒rna，用于禽流感病毒感染的輔助診斷，其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
出血性大腸桿菌(EHEC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；剛開始時(shí), 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。

出血性大腸桿菌(EHEC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（30 uL 體系）

在PCR 管中加入下列成分：

[1] 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。

出血性大腸桿菌(EHEC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)  電泳檢測(cè)RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 286 bp。

出血性大腸桿菌(EHEC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   【參考值（參考范圍）】

結(jié)果判定
1 結(jié)果分析條件設(shè)定 閾值設(shè)定原則：閾值線設(shè)定于剛好超過陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線的點(diǎn)。不同儀器可根據(jù)儀器噪音

情況進(jìn)行調(diào)整。

2  結(jié)果描述及判定

陽(yáng)性對(duì)照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無(wú) Ct 值并且無(wú)特定擴(kuò)增曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成 立；被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線為 AIV 陽(yáng)性；被檢樣品 30＜Ct＜37 并出現(xiàn)特定的擴(kuò) 增曲線，需重新取樣提取 RNA，擴(kuò)增后進(jìn)行結(jié)果判定，如仍是可疑，可判定為陽(yáng)性；被檢樣品 Ct 值≥37 時(shí)，超過本方法檢測(cè)靈敏度范圍，判定為陰性；對(duì)于某些未呈現(xiàn) S 型曲線，但本底較高的樣 品，應(yīng)為陰性。