
遠緣鏈球菌(S.sob)檢測試劑盒-PCR-熒光探針法
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訂貨量(千克)
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上海滬崢生物科技有限公司
店齡6年
企業(yè)認證
聯(lián)系人
李小姐
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經營模式
生產商,貿易商,
所在地區(qū)
上海市奉賢區(qū)
產品名稱:遠緣鏈球菌(S.sob)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法
包裝:48T
分類:pcr-熒光試劑盒
用途:本產品僅供科研與實驗使用,不用于臨床診斷等
目的:本試劑盒適用于檢測疑似感染者或發(fā)病動物等組織、體液或淋巴結等標本中禽流感病毒rna,用于禽流感病毒感染的輔助診斷,其檢測結果僅供參考。
遠緣鏈球菌(S.sob)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。
遠緣鏈球菌(S.sob)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法設置 RT-PCR 反應(30 uL 體系)
在PCR 管中加入下列成分:
成份 |
樣品 |
陽性對照 |
陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer, 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機,按下面參數(shù)進行 RT-PCR。
遠緣鏈球菌(S.sob)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法電泳檢測RT-PCR 產物。預期的PCR 產物長度為 286 bp。
實驗操作
1.模板制備(樣本制備區(qū))
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產品,具體過程詳見產品說明書。
2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒上進行)
剪下所需測試數(shù)的已含有反應液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開封口膜,向每管反應液中分別加入5μL模板,順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30s,離心1min,立即進行PCR擴增反應。
3. 擴增反應(擴增及產物分析區(qū))
使用熒光定量PCR儀,熒光基團選擇FAM,淬滅基團選擇TAMRA。

