轉基因植物Cry3A基因檢測試劑盒(PCR法)
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經(jīng)營模式
生產(chǎn)商,貿易商,
所在地區(qū)
上海市奉賢區(qū)
產(chǎn)品名稱:轉基因植物Cry3A基因核酸檢測試劑盒(PCR法)
檢測方法: 實時熒光 PCR
規(guī) 格: 50T
保存方式: 2~8℃
有 效 期: 1年
產(chǎn) 地: 中國
用 途: 僅用于科研實驗
訂購流程:轉基因植物Cry3A基因核酸檢測試劑盒(PCR法)
電話或通過在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
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2.進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
3.訂貨時間為工作日每周一至周五17:00之前。
4.如因單位財務制度原因,可申請先發(fā)貨,報賬后付款(此條款僅限醫(yī)院、學校信譽良好的 客戶)。
ELISA常見問題:轉基因植物Cry3A基因核酸檢測試劑盒(PCR法)
利用ELISA進行檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原:ELISA抗原有三類:液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。
純度不高可導致試劑盒的特異性不強,合成抗原一般都是多肽抗原,
試劑盒一般為基因重組抗原??乖兌炔桓?,特異性就不強,
2、抗體特異性和親和力的大小會影響試劑盒的特異性和敏感性
3、酶結合物,試劑盒的保存時間通常由酶的穩(wěn)定性決定。
最常用的就是辣根過氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液(PBS)
堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了,因為殘留的PBS會抑制一半的酶活性。
TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(OPD對機體有突變作用,所以改用TMB)
轉基因植物Cry3A基因核酸檢測試劑盒(PCR法)
結果判定
1 結果分析條件設定 閾值設定原則:閾值線設定于剛好超過陰性對照擴增曲線的點。不同儀器可根據(jù)儀器噪音
情況進行調整。
2 結果描述及判定
陽性對照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴增曲線,陰性對照無 Ct 值并且無特定擴增曲線,實驗結果成 立;被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴增曲線為 AIV 陽性;被檢樣品 30<Ct<37 并出現(xiàn)特定的擴 增曲線,需重新取樣提取 RNA,擴增后進行結果判定,如仍是可疑,可判定為陽性;被檢樣品 Ct 值≥37 時,超過本方法檢測靈敏度范圍,判定為陰性;對于某些未呈現(xiàn) S 型曲線,但本底較高的樣 品,應為陰性。
實驗操作
1.模板制備(樣本制備區(qū))
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒上進行)
剪下所需測試數(shù)的已含有反應液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開封口膜,向每管反應液中分別加入5μL模板,順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30s,離心1min,立即進行PCR擴增反應。
3. 擴增反應(擴增及產(chǎn)物分析區(qū))
使用熒光定量PCR儀,熒光基團選擇FAM,淬滅基團選擇TAMRA。