品牌 博研生物
CAS 有質(zhì)量問題包退換
含量 1
產(chǎn)品認(rèn)證 科研實(shí)用
加工定制 按需求
執(zhí)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 企業(yè)
級(jí)別 試驗(yàn)試劑盒LR
自重 300g
貿(mào)易屬性 內(nèi)銷
顏色 白色
商品介紹
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 (CACT)ELISA試劑盒
南京博研生物科技有限公司成立于江蘇南京,經(jīng)過多年的努力發(fā)展已成為集產(chǎn)品研發(fā)、產(chǎn)銷售為-體的專業(yè)化生物公司。旗下產(chǎn)品種類眾多。承以產(chǎn)品質(zhì)量為根本,以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向,以為客戶創(chuàng)造價(jià)值為己任的精神,致力于發(fā)展中國的科研事業(yè)。力求為我國生物科技事業(yè)提供更好的、更專業(yè)性的技術(shù)服務(wù)和科研產(chǎn)品。
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 (CACT)ELISA試劑盒
樣本采集與貯存細(xì)胞培養(yǎng)上清2000 × g條件下離心20m分鐘,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。血清樣本離心管收集血清。血樣凝集 30 分鐘后,2000 × g 離心 10 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測(cè),或者分裝,-20℃以下貯存,避免反復(fù)凍融。血漿樣本EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。2000 × g 離心 20 分鐘收集樣本。即刻檢測(cè), 或者分裝,-20℃以下貯存,避免反復(fù)凍融。組織樣本用預(yù)冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(般按1: 9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9 mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推 薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進(jìn)步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻 漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。后將勻漿液5000×g離心 5-10分鐘,取上清檢測(cè)。細(xì)胞提取液樣本貼壁細(xì)胞用冷的PBS輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g離心5分鐘后收集細(xì)胞;懸浮 細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的PBS 洗滌3次。每 1×106 個(gè)細(xì)胞中加入150-200μL PBS重懸并通過反 復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少PBS的體積)。將提取液于1500×g離心10分鐘,取上清檢測(cè)。注意:1)避免樣本的反復(fù)凍融,在檢測(cè),冷凍樣本應(yīng)緩慢地恢復(fù)至室溫,輕柔混勻。 2)本試劑盒可能適用于其它生物學(xué)樣本,但是未充分驗(yàn)證。
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 (CACT)ELISA試劑盒
試劑準(zhǔn)備1)用,所有的組分都要至少復(fù)溫30min,確保充分復(fù)溫到室溫。2)濃縮洗滌液:從冰箱取出的濃縮洗滌液,會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié) 晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水,按1:20稀釋,即1份的濃縮洗滌液,添加19份的蒸餾水。
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 (CACT)ELISA試劑盒
檢測(cè)步驟1、試劑、樣本平衡:檢測(cè)之請(qǐng)將所有的試劑、樣本平衡至室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。配置工作液:按面試劑準(zhǔn)備中描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。1)加標(biāo)準(zhǔn)品、樣本:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,樣本孔加待測(cè)樣本50μL,空白孔不加。2)加 HRP標(biāo)記抗體:除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。3)孵育:使用封板膜封板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60分鐘。4)洗滌:棄掉液體,每孔加入300μL洗液洗板,靜置20s,洗滌5次。每次洗板,在吸水紙上拍 干。為獲得理想的實(shí)驗(yàn)性能,必須徹底移除殘留液體。5)加底物顯色:每孔加入50μL顯色底物A、B 各50μL,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15分鐘。6)加終止液:每孔加入50μL終止液。顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果顏色呈現(xiàn)綠色或者顏色的變化 明顯不均勻,請(qǐng)輕輕叩擊板框,充分混勻。7)檢測(cè)讀數(shù):在 15分鐘之內(nèi),使用450nm酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)讀數(shù)。
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