武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
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洋蔥亞細(xì)胞定位-思特進(jìn)-亞細(xì)胞定位方法
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
Δ8途徑是合成多不飽和脂肪酸的替代途徑,Δ8-脂肪酸脫氫酶是該途徑的關(guān)鍵酶之一。根據(jù)已報道的Δ8-脂肪酸脫氫酶基因設(shè)計引物,分別從小眼蟲藻基因組DNA和cDNA中擴(kuò)增得到該基因片段,序列分析表明:結(jié)構(gòu)基因長1 266 bp,編碼421個氨基酸;該基因沒有內(nèi)含子,比已...
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
目的構(gòu)建通用型植物GFP標(biāo)簽蛋白表達(dá)載體,研究蛋白質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)定位對蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)等研究的意義。方法構(gòu)建2種GFP標(biāo)簽蛋白質(zhì)表達(dá)載體,分別在GFP的N和C端預(yù)留位點,以目的基因。利用該基因載體,分別內(nèi)切酶Fok I的切割結(jié)構(gòu)域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯(lián)蛋白(Fok I:MCP:Fok I,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端帶有細(xì)胞核定位信號。利用農(nóng)介導(dǎo)植物瞬時表達(dá)侵染本氏和洋蔥表皮細(xì)胞,觀察GFP熒光表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建了2種融合了目的基因和GFP的表達(dá)載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結(jié)果顯示侵染了只含GFP載體的農(nóng)的細(xì)胞,可在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中檢測到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號FMF:GFP和GFP:FMF 2種融合蛋白載體的農(nóng)的細(xì)胞,只在細(xì)胞核中觀察到綠色熒光。結(jié)論該載體系統(tǒng)可運用于研究蛋白質(zhì)在植物細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位,具有簡單、和通用性的特點。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
綜述了根癌農(nóng)介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化近幾年獲得的新進(jìn)展在轉(zhuǎn)化機(jī)理方面,對農(nóng)自身轉(zhuǎn)錄與調(diào)控的研究已相當(dāng)深入,而對有關(guān)的植物編碼因子的研究也已取得了實質(zhì)性進(jìn)展;在轉(zhuǎn)化范圍上,對真菌與裸子植物的轉(zhuǎn)化取得了不少進(jìn)展,單子葉植物尤其是一些有重要經(jīng)濟(jì)價值的禾谷類作物應(yīng)用農(nóng)介導(dǎo)相繼獲得了轉(zhuǎn)化植株;在轉(zhuǎn)化方法方面,發(fā)展了新的簡單有效的整體植株法,并將T-DNA轉(zhuǎn)移和整合原理結(jié)合到基因槍等DNA直接轉(zhuǎn)移方法上;細(xì)菌人工染色體與農(nóng)的聯(lián)合應(yīng)用賦予了其大片段DNA轉(zhuǎn)化的功能.針對上述領(lǐng)域,指出了其中仍然存在的一些問題并提出了一些構(gòu)想.