Annexin V-AF647染色液用于鑒定凋亡和壞死細胞。
      Annexin V是一種鈣離子依賴性磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸PS有高度親和力，可通過細胞外側(cè)暴露的PS與凋亡早期細胞胞膜結(jié)合，將Annexin V標記熒光染料AF647利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡。
      Annexin V搭配碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或7-AAD等DNA染色液使用，可區(qū)分處于不同凋亡時期的細胞。
      本試劑搭配PI檢測喜樹堿誘導的Jurkat細胞凋亡效果如下圖所示：

實驗操作指南步驟：

1. 細胞按照實驗方案進行凋亡誘導，300g離心5min，棄上清，收集細胞，PBS洗滌一次，輕輕重懸細胞并計數(shù)。
   注：本品僅在懸浮培養(yǎng)的細胞中驗證，良好的細胞狀態(tài)是實驗的關鍵。貼壁生長的細胞用于凋亡檢測時，可能會因為胰酶消化等處理導致細胞的壞死或凋亡，對實驗結(jié)果可能存在不可控的影響，請謹慎處理。

2. 取1-5×10^5重懸的細胞，300g離心5min，棄上清。用PBS洗滌細胞一次，離心后棄上清，加入500μL稀釋的1×Annexin V Binding Buffer工作液重懸細胞。

3. 細胞懸液中加入5μL的Annexin V-AF647染色液和5μL的細胞核DNA染色液。

4. 輕柔渦旋混勻后，室溫避光孵育15-20min。

5. 反應完成后立即上機檢測。如不能及時檢測，請于冰上避光靜置并于1小時內(nèi)完成檢測。

保存條件：
   4℃可保存1年；Annexin V-AF647染色液需要避光保存。

注意事項：

1. 為獲得最佳的使用效果，請在3-6個月內(nèi)使用，Annexin V-AF647禁止冷凍保存；

2. 染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加；

3. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，操作和存放過程盡量注意避光保存；
   

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5. 
   

(本試劑產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療)

Procell凋亡試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢

• 1、多種標記物（FITC、PE、APC、AF647/PI、7-AAD）選擇，滿足不同待測樣本和檢測儀器的需求；
• 2、多種試劑盒相關組分在售，靈活滿足不同的實驗需求；
• 3、檢測早期凋亡最理想的方法，不需固定環(huán)節(jié)從而避免相關的假陽性；
• 4、只需15-20分鐘，簡單快捷；
• 5、嚴格可靠的質(zhì)量控制，保證優(yōu)異的實驗結(jié)果；
• 6、專業(yè)的售前售后技術(shù)支持，幫助您更好完成凋亡實驗。

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