解脲支原體(UU)試劑盒(熒光-PCR法)

規(guī)格：50T/盒

英文名稱：UUDetection Kit (Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】50T/盒

自備試劑：樣品 RNA

【檢驗原理】

本試劑盒對解脲支原體(UU)基因保守區(qū)設(shè)計特異性的引物和探針[1-3]，用熒光 PCR 技術(shù)對核酸進行體外擴增檢測，從而達到快速檢測之目的。

試劑組成】

名 稱	規(guī) 格
酶液	50μL×1 管
UU反應(yīng)液	500μL×2 管
UU陽性質(zhì)控品	50μl ×1 管
陰性質(zhì)控品	250μl×1 管

【儲存條件及有效期】

-20℃避光保存、運輸、避免反復(fù)凍融，有效期12個月。

【適用儀器】

ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。
【保存和運輸】

上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過6個月，標本運送應(yīng)采用0℃冰壺。

結(jié)果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線；

可疑：檢測通道 35值≤38，建議重復(fù)檢測，如果檢測通道仍為 35值≤38， 且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；

陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

質(zhì)控標準

陰性質(zhì)控品：Ct 值>38 或無 Ct 值；

陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時滿足，否則實驗視為無效。

解脲支原體(UU)試劑盒(熒光-PCR法)它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。

2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 特異性高，引物是根據(jù)馬動脈炎病毒高度保守區(qū)設(shè)計，不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研

7.．不同批號試劑請勿混合使用，在有效期內(nèi)使用。

運輸及保存： 低溫運輸，2-8℃保存，保存期限為12個月。

樣本提取操作

1. 取 200μL 處理好的樣本（不足 200μL，可以加入 PBS 緩沖液或者生理鹽水補足 200μL），加入 500μL

裂解液，振蕩 30 秒，室溫靜止 2 分鐘。注：針對   難裂解樣本，室溫靜置時間可延長至5 分鐘。

2. 把上述混合液轉(zhuǎn)移到吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時盡量不要吸到懸浮雜質(zhì)，以免阻塞吸附膜），10000rpm 離心 1 分鐘，棄去套管中液體。

3. 向吸附柱中加入 500μL 去蛋白漂洗液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。

4. 向吸附柱中加入 500μL 洗滌液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。

5. 向吸附柱中加入 500μL 洗滌液，12000rpm 離心 30 秒，棄去套管中液體。

6. 12000rpm 再次離心 2 分鐘。

7. 把吸附柱轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL 滅菌離心管中，向吸附柱中加入 50μL 洗脫液，并于室溫溫育 2 分鐘。

8.12000rpm 離心 1 分鐘，棄去吸附柱，1.5mL 滅菌離心管中液體即為 DNA/RNA 溶液。提取的 DNA/RNA

可直接用于各種下游應(yīng)用試驗，如不立即使用，請于-80℃保存。