![](/resources/assets/images/mobile.png)
大腸桿菌TG1化學感受態(tài)細胞-KLANG
價格
訂貨量(瓶)
¥890.00
≥1
¥860.00
≥5
店鋪主推品 熱銷潛力款
잵잲잭잵잳잳잯잭잲잭잵
在線客服
![](/resources/assets/images/product_detail/free_bg.png)
上海康朗生物科技有限公司
店齡6年
企業(yè)認證
聯(lián)系人
蔡經(jīng)理 銷售經(jīng)理
聯(lián)系電話
잵잲잭잵잳잳잯잭잲잭잵
經(jīng)營模式
生產(chǎn)廠家
所在地區(qū)
上海市閔行區(qū)
大腸桿菌TG1化學感受態(tài)細胞
產(chǎn)品及特點本產(chǎn)品是采用大腸桿菌 TG1 菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可直接用于 DNA 的化學轉(zhuǎn)化。
本試劑盒具有下列特點:
1. 使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達 108,-80℃保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不改變。
2. 可用于高效轉(zhuǎn)化 150Kb 大小的質(zhì)粒,可用于藍白斑篩選。
3. 本產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,使用方便,質(zhì)優(yōu)價廉。
號及其含義列表如下:
基因型符號 含義
K-12
K-12系的所有菌種默認都攜帶F因子和?、e14、rac
三種原噬菌體。其中的e14攜帶野生型mcrA基因,
其產(chǎn)物可對甲基化的CG切割。
F'[traD36
proAB+ lacI
q
lacZΔM
15]
本菌株攜帶的F因子上還攜帶下列染色體基因:突變
的traD36基因,使菌株能夠發(fā)生結(jié)合但F因子轉(zhuǎn)移
能力喪失;野生型proAB
+使菌株可以合成脯氨酸;
突變的lacI
q使得lac抑制蛋白過表達,降低lac啟動
子的背景表達; lacZ△M15的?-半乳糖苷酶基因
可與攜帶?片段的質(zhì)?;パa恢復酶活性,用于藍白斑
篩選
△(lac-proAB )
缺失lac操縱子和脯氨酸合成基因,不能合成?-半乳糖苷酶和脯氨酸hsd△5
EcoK系統(tǒng)的甲基化酶失活,不會甲基化Eco位點的AsupE
同glnV,使得終止子UAG編碼谷氨酰胺,減輕UAG
突變(琥珀突變)的傷害
thi-1 不能合成硫氨(維生素B1)
規(guī)格及成分 成分 編號 小扁盒包裝
大腸桿菌 TG1 化學感受態(tài)細胞 LM80701 0.1 mL×10
使用手冊 LM80701sc 1 份
4. 大腸桿菌 TG1 菌株基因型是 K-12, supE,thi-1,Δ(lac-proAB), Δ(mcrB-hsdSM)5, (rK -mK - ), F' [traD36 proAB+ lacI q lacZΔM15]。
規(guī)格及成分 成分 編號 小扁盒包裝
大腸桿菌 TG1 化學感受態(tài)細胞 80701 0.1 mL×10
使用手冊 80701sc 1 份
運輸及保存 干冰運輸、-80℃保存,有效期半年。
自備試劑 目的 DNA、SOC 或 LB 培養(yǎng)基等
使用方法
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100μl,可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以 50 μl 感受態(tài)細胞為例。
2. 待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的 DNA(根據(jù)實際情況加入適量的 DNA,通常 100 μl 感受態(tài)細胞能夠被 1 ng 超螺旋質(zhì)粒 DNA 所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
3. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
4. 每個離心管中加入 450 μl 無菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150 rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘使菌體復蘇。
5. 根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含有相應抗生素的 SOC 或 LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于 37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng) 12-16 小時。
注意:
1. 涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多,可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板;若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較少,可取 200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預計的克隆數(shù)較少,可通過離心(4,000 rpm ,2 分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,可將平板正置于 37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3. 涂布剩余的菌液可置于 4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少,可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
![](/resources/assets/images/product_detail/icon_qq.png)
![](https://img.zhaosw.com/upload/images/201912/17/cf4330be-e981-41b6-8378-e49bf479133b.jpg)