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大腸桿菌JM109感受態(tài)細(xì)胞-KLANG
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店鋪主推品 熱銷潛力款
钳钻钹钳钵钵钼钹钻钹钳
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店齡6年
企業(yè)認(rèn)證
聯(lián)系人
蔡經(jīng)理 銷售經(jīng)理
聯(lián)系電話
钳钻钹钳钵钵钼钹钻钹钳
經(jīng)營模式
生產(chǎn)廠家
所在地區(qū)
上海市閔行區(qū)
主營產(chǎn)品
大腸桿菌JM109感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品及特點本產(chǎn)品是采用大腸桿菌 JM109 菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于 DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。本試劑盒具有下列特點:
1. 使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108,-80℃保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
2. recA1 和 endA1 突變阻止對克隆 DNA 的修飾或?qū)λ拗骶旧?DNA 的重組,提高純化 質(zhì)粒的產(chǎn)量和質(zhì)量。
3. JM109 菌株基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB) [F’ traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
規(guī)格及成分 成分 包裝
本產(chǎn)品 0.1mL×10
使用手冊 1 份
運輸及保存 干冰運輸、-80℃保存,有效期半年。
使用方法
1. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100μl,可以根據(jù) 實際情況分裝使用。 以下實驗以 50 μl 感受態(tài)細(xì)胞為例。
2. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的 DNA(根據(jù)實際情況加入適量 的 DNA,通常 100 μl 感受態(tài)細(xì)胞能夠被 1 ng 超螺旋質(zhì)粒 DNA 所飽和),用移液器 輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
3. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
4. 每個離心管中加入 450 μl 無菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床,150 rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 固體 瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于 37℃直至液體被吸收, 倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng) 12-16 小時。
注意:
1 涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多,可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板; 若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較少,可取 200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計的克隆數(shù)較少, 可通過離心(4,000 rpm ,2 分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,可將平板正置于 37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
4. 本產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,使用方便,質(zhì)優(yōu)價廉。
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