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主營(yíng)產(chǎn)品: 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品, ELISA試劑盒, 化學(xué)試劑, 分析試劑
大腸桿菌BL21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞-KLANG
價(jià)格
訂貨量(瓶)
¥680.00
≥1
¥650.00
≥5
店鋪主推品 熱銷潛力款
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經(jīng)營(yíng)模式
生產(chǎn)廠家
所在地區(qū)
上海市閔行區(qū)
主營(yíng)產(chǎn)品
大腸桿菌BL21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品及特點(diǎn)BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞來(lái)源于 BL21(DE3)菌株,由特殊工藝制作,使用 pUC19質(zhì)粒檢測(cè)本產(chǎn)品,轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107cfu/μg。BL21 Star(DE3)菌株的特點(diǎn)是含有 rne131 基因突變體。rne131 突變基因能夠增強(qiáng)菌株細(xì)胞內(nèi) mRNA 的穩(wěn)定性,從而有效提高蛋白表達(dá)能力。本產(chǎn)品主要適用于 T7 啟動(dòng)子表達(dá)載體(如 pET 系列)的高水平蛋白表達(dá)。菌株基因型為:F- ompT hsdSB(rB-mB) gal dcm rne131(DE3)
規(guī)格及成分 成分 編號(hào) 包裝
本產(chǎn)品 LM90505 0.1 mL×10
使用手冊(cè) 1 份
運(yùn)輸及保存 干冰運(yùn)輸、-80℃保存,有效期半年。
自備試劑 目的 DNA、LB 培養(yǎng)基等
使用方法
1. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100μL,可以根據(jù) 實(shí)際情況分裝使用。 以下實(shí)驗(yàn)以 50 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
2. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的 DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量 的 DNA,通常 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞能夠被 1 ng 超螺旋質(zhì)粒 DNA 所飽和),用移液器 輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
3. 42℃熱擊 45 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
4. 每個(gè)離心管中加入 450 μL 無(wú)菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床,150 rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 固體 瓊脂培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于 37℃直至液體被吸收, 倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí)。
注意:
1. 涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多,可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板; 若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較少,可取 200-300 μL 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計(jì)的克隆數(shù)較 少,可通過(guò)離心(4,000 rpm,2 分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于 平板中。
2. 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,可將平板正置于 37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3. 涂布剩余的菌液可置于 4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過(guò)少,可以將剩下的菌液再 涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
采購(gòu)數(shù)量不能為空
聯(lián)系信息不能為空
驗(yàn)證碼不正確