武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司主營(yíng)：動(dòng)植物，細(xì)菌，細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。

熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）是20世紀(jì)80年代末在性原位雜交技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的新技術(shù)，是以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法熒光原位雜交技術(shù)問(wèn)世于20世紀(jì)70年代后期。1977年，熒光標(biāo)記的被應(yīng)用于識(shí)別特異性DNA—RNA雜交I I。1980年，J.G.Baunlan等將應(yīng)用化學(xué)偶聯(lián)的方法將熒光素結(jié)合到RNA探針上用于直接快速的特異性靶序列檢測(cè)。熒光原位雜交技術(shù)技術(shù)原理是將熒光素直接或間接標(biāo)記的核酸探針[或生物素、、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等標(biāo)記的核酸探針與待測(cè)樣本中的核酸序列按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則進(jìn)行雜交，經(jīng)洗滌后直接在熒光顯微鏡下觀察。

熒光原位雜交技術(shù)是一種重要的非性原位雜交技術(shù)，原理是利用報(bào)告分子（如生物素、等）標(biāo)記核酸探針，然后將探針與染色體或DNA纖維切片上的靶DNA雜交，若兩者同源互補(bǔ)，即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。此時(shí)可利用該報(bào)告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的化學(xué)反應(yīng)，經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待DNA進(jìn)行定性、定量或相對(duì)定位分析。 [1]

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。

顯色以下各步均在室溫下進(jìn)行。

（1）緩沖液I洗1min。

（2）用含2%正常羊和0.3％TritonX-100的緩沖液I孵育切片30min。

（3）用含1％正常羊和0.3％TronX-100的緩沖液I稀釋羊抗Dig。

（4）將稀釋液滴加在切片上，封口膜覆蓋，濕盒內(nèi)4℃孵育過(guò)夜。

（5）緩沖液I洗10min。

（6）緩沖液Ⅱ洗10min。

（7）加顯色液，封口膜覆蓋，避光室溫孵育2～20h，隨時(shí)鏡檢，當(dāng)顯色滿意時(shí)入緩沖液Ⅲ終止顯色。

顯色液臨用前配，其配方為：①NBT 45μl；②X-Phospllate液 35μl；③左旋咪唑      2.4mg；④緩沖液Ⅱ 加至10ml。

（8）常規(guī)脫水、透明、封固。

結(jié)果：雜交陽(yáng)性信號(hào)為紫藍(lán)色顆粒。

武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái)；可以開(kāi)展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。

原位雜交對(duì)照試驗(yàn)

同組織化學(xué)染色對(duì)照一樣，為證明原位雜交實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的特異性，需要設(shè)置一系列對(duì)照實(shí)驗(yàn)，具體的各種對(duì)照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置及其意義請(qǐng)參考原位雜交專著，以下僅介紹幾種常用的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。