一管式病毒DNAout

產(chǎn)品及特點(diǎn) 本產(chǎn)品是專門用于從血清(血漿)等液體樣品中提取病毒(如 HBV)DNA 的產(chǎn)品，其原理是異硫氰酸胍/LiCl 溶液即能裂解病毒，又能沉淀 DNA。本產(chǎn)品靈敏度高，穩(wěn)定性好，使用簡單快捷，尤其適合于整合到臨床 PCR 檢測試劑盒中。

1. 回收率高，可以達(dá)到 90%以上，高于絕大部分基于離心柱的提取方法。

2. 靈敏度高，通過 PCR 檢測到的最終靈敏度可以達(dá)到 30-50 拷貝/mL。

3. 一管式操作，不使用離心柱，整個操作過程均在室溫下完成。

4. 安全無毒，不需要使用苯酚和氯仿等有機(jī)溶液。

5. 處理量大，如果加上病毒離心富集步驟，最多可以處理 1.5 mL 液體病毒樣品。

6. 與 PCR 和熒光 PCR 兼容。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。 
規(guī)格及成分 成 份 編 號 塑料袋包裝 
DNA 病毒裂解液 3674a 30 mL 使用手冊 3674sc 1 份 

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。

自備試劑 異丙醇，70%乙醇

使用方法

 1. 在 1.5 mL 螺旋蓋塑料離心管(不要使用壓蓋式塑料離心管)中加入 0.2 mL 液體樣品（血清、血漿、尿液、腦脊液、唾液、眼淚等等）。

1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各種拭子樣品，則將拭子放入 0.2mL自備生理鹽水中擠壓出液體，然后取 0.2mL 進(jìn)行 DNA 提取。

1.2、 如果是糞便等半固定樣品，則取約 0.3mL 的樣品，加入 0,3 自備生理鹽水，震蕩重懸，離心取 0.2mL 上清進(jìn)行 DNA 提取。

1.3、 如果血液，細(xì)胞培養(yǎng)液等含細(xì)胞的液體，可以離心用上清，也可以直接取用，但后者提取的 DNA 中有細(xì)胞的基因組 DNA。

1.4、 如果樣品是實(shí)體組織或培養(yǎng)細(xì)胞，則需要在自備生理鹽水中勻漿后離心，用 0.2mL 上清液（含病毒）進(jìn)行 DNA 提取，但此種情況下最后得到的 DNA 不可避免的會含有基因組 DNA。

1.5、 如果液體樣品中的病毒需要富集，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液體在 4℃ 24,000 g 冷凍離心 60 分鐘, 移棄 1.3 mL、用剩下的0.2mL 繼續(xù)操作。

2. 在 0.2mL 樣品中加入 0.6mL DNA 病毒裂解液，振蕩 30 秒混勻后室溫放置10 分鐘。

3. 振蕩 30 秒混勻后加入 0.7 mL 自備的異丙醇，振蕩 30 秒混勻后，15,000 g室溫離心 15 分鐘。

4. 移棄上清，注意不要觸及管底的 DNA 沉淀，加入 1.0 mL 70%乙醇，振蕩數(shù)秒后 15,000 g 室溫離心 5 分鐘。

5. 移棄上清，注意不要觸及管底的 DNA 沉淀。再短暫離心數(shù)秒, 移棄殘留液體（殘留的乙醇會影響后續(xù)反應(yīng)）。如果此時離心面的管壁上有可見的膜狀沉淀，屬于正常現(xiàn)象（常見于血清血漿樣品）。加入 20uL 核酸樣品稀釋液，用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀，使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正?，F(xiàn)象。不要離心只取上清使用，因?yàn)椴蝗艹恋砦镏泻?DNA，必須取混合液使用（哪怕很渾濁）。

6. 樣品可以直接取適量用于 PCR，也可保存于-20℃長期保存。