柱式骨骼DNAout

產(chǎn)品及特點(diǎn)

本產(chǎn)品是專門用于從動(dòng)物骨骼（包括骨粉）樣品中提取 DNA 的產(chǎn)品，20次規(guī)格足夠 50 次微量提取。它具有下列特點(diǎn)：

1. 微量提取，一次可以處理 300 mg 左右的骨骼（但需要先將骨粉變成骨粉）。

2. 柱式操作，方法簡(jiǎn)單，整個(gè)過程只需要 40-60 分鐘。

3. 得到的 DNA 分子量不均勻，一般在 20 Kb 到 100 bp 之間，具體取決于骨骼的新鮮程度，骨粉的加工方法等。

4. 得到的 DNA 可以直接用于 PCR 或熒光 PCR 反應(yīng)。
規(guī)格及成分 成份 編號(hào) 大紙盒包裝 
柱式骨骼 DNAout 溶液 A 91102a 50 mL 柱式骨骼 DNAout 溶液 B 91102b 15 mL（棕色瓶） 柱式骨骼 DNAout 溶液 C 91102c 30 mL 離心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脫液 2.0 111205 10 mL 使用手冊(cè) 91102sc 1 份

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

自備試劑 氯仿

使用方法 

1. 骨粉的制備：用自備酒精將骨骼表面擦洗干凈，以防污染物對(duì)后續(xù) PCR的影響，然后用骨鉆在處理干凈的骨骼區(qū)域鉆取骨粉。對(duì)于已經(jīng)制備好的、商品化的骨粉，可以跳過此步，直接進(jìn)入下一步。

2. 用天平稱取 0.2 克骨粉，轉(zhuǎn)移到 2 mL 塑料離心管中。

3. 加入 1 mL 溶液 A 到骨粉中，充分振蕩 30 秒混勻。（注意：溶液 A 在 4℃放置后可能會(huì)產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用，且骨粉加到溶液 A 中后會(huì)特別黏稠，需使勁振蕩混勻。）

4. 65℃水浴放置 30 分鐘。

5. 加入 0.3 mL 的溶液 B 和 0.2 mL 的自備氯仿，充分振蕩 30 秒混勻。

6. 12,000 rpm 室溫離心 3 分鐘，小心將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的塑料離心管中。

7. 加入 0.5 mL 溶液 C，顛倒混勻。

8. 將混合液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，每次轉(zhuǎn)移后需要 12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘，并棄收集管中的穿透液。

9. 加入 0.5 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中穿透液。

10.再加入 0.5 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000 rpm 室溫離心 1 分鐘，棄收集管中穿透液。

11.12,000 rpm 室溫離心半分鐘，棄含穿透液的收集管。此步干甩十分重要，否則殘留的液體會(huì)抑制后續(xù)的 PCR。

12.將離心吸附柱套入到一個(gè)自備的干凈的 1.5 mL 塑料離心管中，在離心吸附柱的濾膜的中部加入 30 uL DNA 洗脫液，然后室溫放置 2 分鐘。如果先將 DNA 洗脫液預(yù)熱到 60-80℃再使用，效果更佳。

13.12,000-15,000 g 室溫離心 1 分鐘，離心管中收集的樣品即為骨骼 DNA。

14.取少量進(jìn)行電泳檢測(cè)。注意：一般 DNA 都呈現(xiàn)彌散狀，分布在 20 Kb 到100 bp 這一廣泛的范圍，其比例跟骨骼（或骨粉）的新鮮程度、加工過程（對(duì)骨粉）等因素密切相關(guān)。

15. DNA 樣品可以直接用于 PCR，也可放-20℃長(zhǎng)期保存。