
非酶多糖劑(RNA專用)/KLANG
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經(jīng)營(yíng)模式
生產(chǎn)廠家
所在地區(qū)
上海市閔行區(qū)
主營(yíng)產(chǎn)品
非酶多糖清除劑(RNA專用)
產(chǎn)品及特點(diǎn)
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是臨床分子生物學(xué)研究中的一個(gè)棘手的問(wèn)題。為解決此問(wèn)題,本公司在非凍型組織RNA保存液的基礎(chǔ)上,開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品,它具有下列特點(diǎn):
1. 能快速滲透到新鮮血液細(xì)胞內(nèi),抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常溫可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3個(gè)月。
2. 操作簡(jiǎn)單,直接將本產(chǎn)品和新鮮血液細(xì)胞沉淀按比例混合即可。
3. 適用于人新鮮血和哺乳動(dòng)物新鮮血液,不適用于陳舊血液和凍凝血液,也不適用于禽類(lèi)血液和其他動(dòng)物血液。
4. 重復(fù)性好,效果跟進(jìn)口同類(lèi)產(chǎn)品相當(dāng)。
5. 保存的樣品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。
使用及效果
將本產(chǎn)品與新鮮血液樣品按4:1的比例(4份本產(chǎn)品加1份新鮮血液)混合后即可放置。放置結(jié)束后將樣品轉(zhuǎn)移到離心管中,5000 g室溫離心1分鐘,小心吸出淺粉紅色的上清液,棕紅色沉淀(血細(xì)胞和蛋白沉淀)直接用于后續(xù)的總RNA提取。
1. 新鮮細(xì)胞:如果試劑沒(méi)有問(wèn)題,且外源性污染也可以排除,那么降解幾乎都來(lái)自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養(yǎng)皿中裂解細(xì)胞,一定要使裂解液能覆蓋住細(xì)胞。
2. 新鮮組織:某些富含內(nèi)源核酸酶的樣品(如肝臟,胸腺等),即使使用電動(dòng)勻漿器勻漿也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是:在液氮條件下將組織研碎,并且勻漿時(shí)使用更多裂解液。
3. 冷凍樣品:樣品取材后應(yīng)立即置于液氮中速凍,然后移至-70℃冰箱保存。樣品決不能未經(jīng)液氮速凍而直接保存于-70℃冰箱中。冷凍樣品,即使是冷凍細(xì)胞,如果不在液氮條件下研磨碎,而直接加入裂解液中勻漿,RNA也比新鮮樣品更容易降解。樣品在與裂解液充分接觸前決不能出現(xiàn)融化,所以研磨用具必須預(yù)冷,在碾磨過(guò)程中要及時(shí)補(bǔ)充液氮。樣品研碎后,在液氮?jiǎng)倓倱]發(fā)完時(shí),將樣品迅速轉(zhuǎn)移到含裂解液的容器中,立即混勻勻漿。
4. 外源RNA酶的污染:試劑,器械及實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的RNA酶進(jìn)入實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),可考慮華越洋產(chǎn)品:外源RNA酶清除劑(RNase remover)解決。
5. 內(nèi)源RNA酶的污染:抑制劑失效或者用量不夠,實(shí)驗(yàn)樣品過(guò)多;勻漿時(shí)溫度過(guò)高。
RNA提取得率低
1. 該組織或者細(xì)胞中RNA含量偏低:不同細(xì)胞和組織中RNA的豐度不同,如肝臟,胰腺,心臟等是高豐度組織(總RNA含量2-4μg/mg),腦,胚胎,腎臟,肺,胸腺,卵巢等是中豐度組織(總RNA含量0.05-2μg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低豐度組織(總RNA含量<0.05μg/mg)。
2. 組織起始量太少或者太多:樣品量過(guò)少,則細(xì)胞組織中RNA含量較低;樣品量過(guò)多則可能超過(guò)裂解液的裂解能力,裂解將不完全,從而導(dǎo)致RNA得率低。

