武漢思特進科技發(fā)展有限公司
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原位雜交技術(shù)-原位雜交檢測-思特進
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原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精3確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進行。
原位雜交技術(shù)(In situ hybridization,ISH)是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細胞學(xué)相結(jié)合而產(chǎn)生的一門新興技術(shù),始于20世紀(jì)60年代。
原位PCR;原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結(jié)合的技術(shù),在細胞(爬片、甩片或涂片)或組織(石蠟、冰凍切片)上直接對靶基因片段進行擴增,通過摻入標(biāo)記基團直接顯色或結(jié)合原位雜交進行檢測的方法。
原位雜交技術(shù)可應(yīng)用于什么方面
1.細胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位 可用于基因圖譜、基因表達和基因組進化的研究。
2.感6染組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位,如EB病毒mRNA、人類乳3頭狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測。
3.癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達及其變化的檢測。
4.基因在染色體上的定位。
5.檢測染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。
6.分裂間期細胞遺傳學(xué)的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳
原位雜交 (ISH) 是用于定位固定組織和細胞中特定核酸靶標(biāo)的強大技術(shù),能夠獲得與基因表達和遺傳位點相關(guān)的時間和空間信息。 雖然ISH的基本工作流程與印跡雜交近似,即核酸探針被合成、標(biāo)記、純化和特異性靶標(biāo)退火,但其不同之處在于前者可通過可視化顯示組織內(nèi)的結(jié)果來獲得更多信息。 如今有兩種基本方法來實現(xiàn)可視化顯示原位RNA和DNA靶標(biāo),即熒光 (FISH) 和顯色 (CISH) 檢測。 每種檢測方法本身的特點(見下表)使得FISH和CISH適用于截然不同的應(yīng)用。 雖然兩種方法均使用標(biāo)記的、與樣本雜交的靶標(biāo)特異性探針,但每種方法用于可視化顯示樣本的儀器不同。 這里我們將強調(diào)每種方法的不同之處和各自的優(yōu)勢。
武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。