PCR實驗室(基因擴增實驗室)( Polymerase Chain Reaction Lab)是指通過擴增檢測特定的DNA或RNA，進行疾病診斷、治療監(jiān)測和預(yù)后判定等的實驗室。這類實驗室通常為負壓或者相對負壓實驗室。主要參考標(biāo)準(zhǔn)為《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》， 臨床基因擴增實驗又稱PCR實驗，是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內(nèi)所含的基因進行擴增的方法，測出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優(yōu)點，因此被臨床醫(yī)生廣為認可，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。但是，這種實驗需要有能保證 dui安全、配置合理的實驗室和非常規(guī)范的操作為前提。近年來對臨床基因擴增檢驗實驗室的建設(shè)越來越得到重視，因為它對檢測結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。本文主要從臨床基因擴增檢驗實驗室的平面布局，空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計、氣流控制和污染的防制幾個方面對實驗室設(shè)計中的主要特點進行了闡述。

  PCR實驗室分為四個區(qū)域，進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出，四區(qū)域分別為：

1.試劑配制區(qū)n
2.樣品處理區(qū)n
3.核酸擴增區(qū)n
4.產(chǎn)物分析區(qū)n
如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并,三四區(qū)可合并為擴增產(chǎn)物分析

各區(qū)的功能是：
    1.1.1 試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴增試劑的配制、分裝和保存。
    1.1.2 樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。
    1.1.3 擴增產(chǎn)物分析區(qū)：擴增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報告。
    1.2 擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應(yīng)嚴格分開，須使用不同的房間，兩區(qū)之間建議有一定的間隔。
    1.3 使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進行少量試劑配制。
    1.4 在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi)：
    1.4.1 在生物安全柜內(nèi)操作。
    1.4.2 每個實驗人員、實驗組分別使用各自的試劑及耗材。
    1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。
    1.4.4 用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實驗前后進行清潔及消毒。

設(shè)計要求：

PCR實驗室可以是分散形式，也可以是組合形式,現(xiàn)要主要是以組合形式為主流。完成一組PCR實驗，通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程，若實驗工藝需要，還應(yīng)增加樣品粉碎過程。

一、鄭州誠志建設(shè)分散形式PCR實驗室
   
所謂分散形式PCR實驗室，是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室，由于各個實驗之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求。

• 組合形式PCR實驗室
     

• 所謂組合形式PCR實驗室, 是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置，組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室，由于各個實驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間，以減少室內(nèi)外空氣交換。

PCR實驗室主要由四個獨立的功能單元構(gòu)成:樣品和試劑準(zhǔn)備區(qū)、核酸提取室(標(biāo)本制備區(qū))、擴増區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)。每個區(qū)之間設(shè)置傳遞窗;每個區(qū)需要有自己的援沖間，當(dāng)不設(shè)置統(tǒng)一的人流出入口時，各緩沖間都要兼作各區(qū)的更衣室。比較好的PCR實驗室可以設(shè)計統(tǒng)一的人員出入口、潔物入口和污物出口。

試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入，造成污染,可以通過控制進風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達到正壓效果。

核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負壓，以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進風(fēng)風(fēng)量達到負壓效果。

在理想情況下，PCR實驗室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。

如果使用熒光PCR儀，擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并。

若房間進深允許，可設(shè)PCR內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。
   
各個區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。 
  
實驗室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

試劑準(zhǔn)備區(qū)  儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈臺、加樣器、混勻器、天平和離心機等，加樣器、天平除了要專用外，還應(yīng)有定期校準(zhǔn)。   試劑分裝應(yīng)在超凈臺中進行  擴增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生物學(xué)級的，試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢：一是否有污染、二是檢測試劑的擴增效果。

標(biāo)本制備區(qū)  儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機、溫育儀、混勻器等

擴增區(qū)  擴增區(qū)的主要儀器是核酸擴增儀、超凈臺、微量加樣器、離心機、可移動紫外燈。擴增儀需進行校準(zhǔn)。并配備UPS電源，以防止由于電壓的波動，停電對擴增效果的影響。

分析區(qū)  本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機、加樣器和水浴箱等

潔凈實驗區(qū)的緩沖間部分面積不能超過主實驗室的八分之一,這是有規(guī)定的。

以上就是鄭州誠志關(guān)于pcr實驗室建設(shè)的簡單介紹。具體請咨詢鄭州誠志客服人員。

河南萬致基因檢測實驗室 WZ-PCR疾控中心pcr實驗室建設(shè)