ELISA檢測概述
      ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒是以免疫學反應為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名稱：大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒
英文名稱：Rat Gelsolin Elisa Kit
貨號：BH-H8909
規(guī)格：48T/96T
自備物品:
1.     酶標儀（450nm）
2.     高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.     37℃恒溫箱

應用范圍：血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體（本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途）
     大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請避光保存。
7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟:
1.        標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2.         加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.         配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.         溫育：操作同3。
8.         洗滌：操作同5。
9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.     測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
Promocell C-27437 Preadipocyte DiffereiationMedium KIT, 前脂肪細胞分化培養(yǎng)基套裝 500mlD-巖藻糖質(zhì)量規(guī)格：>98%,日本進口原裝D-(+)-FUCOSE

小鼠心肌細胞MCMN-乙酰-DL-絲氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Acetyl-DL-Serine

EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照) 玉米素質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRZeatin

人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2水飛薊素質(zhì)量規(guī)格：水飛薊素UV 80%；單賓30%Silymarin

NCI-H446細胞，人小細胞肺癌細胞 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞,C6細胞 CM-H111人成骨細胞完全培養(yǎng)基100mL坎地沙坦酯（標準品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定Candesartan cilexetil
CASK Others Human 人 CASK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 5-溴-4-錄-3-吲哚基-N-乙酰-β-D-基半乳糖苷，英文名或英文縮寫：X-GalNAc，級別：BR，10u/ul，規(guī)格：1克

豬腎細胞;PK(15)1，1-二醌亞安 1,1'-DIcNTHRIMIDq 8--4

BRL 3A細胞，大鼠肝細胞 人轉(zhuǎn)移胰腺癌細胞,AsPc-1細胞 CM-R109大鼠腦成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL無水流醋錳 Mcngcnqsq sulphctq 7782-87-7

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化);PC-12(低分化)結(jié)晶錄化鋁，英文名或英文縮寫：Alumium chloride hexahydrate，級別：AR，99.5%，規(guī)格：5克

IL20RA Others Human 人 IL20Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) LevineEMB瓊脂NA
大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒大鼠小腦顆粒細胞完全培養(yǎng)基 100mL5′-CMP5′- 胞苷酸15KUBR，99%

SNU-638人胃癌細胞 Human gasic cancer cells SNU-638 1640+10% FBS碳醋銅;碳醋銅;鹽基性碳醋銅 Coppqr ccronctq;Cupric subccronctq;Coppqr ccronctq bcsic 1069-69-1

IFNB1 Protein Human 重組人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 標簽)SaikosaponinA柴胡皂甙A25克BR，粘度100 mpe.s

NCI-H2170(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(胚肺細胞)STACKINGGEL,4XBUFFER蛋白濃縮膠緩沖液,4X蛋白組學級500MLRT

lovo, 人結(jié)腸癌細胞(甲喋呤)
C-33 A(人子細胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人導管癌細胞;ZR-75-30殺蟲脲(標準品)Triflumuron質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1戊菌隆(分析標準品,99.5%)Pencycuron質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,99.5%

F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細胞裂解液 (陽性對照) 噻螨酮標準溶液(100μg/ml,u=3%)Hexythiazox solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=3%

人支氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL噻螨酮標準溶液(10μg/ml,u=6%)Hexythiazox solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%

D407細胞，人視網(wǎng)膜色素上皮細胞 出芽短梗霉 人急性T細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572)抑霉唑標準溶液(100μg/ml,u=2%)Imazalil solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%