客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：布氏布氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱：Trypanosoma brucei brucei

貨號(hào)：BJP64208

分類：熒光定量PCR試劑盒

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法

可進(jìn)行相對(duì)，絕對(duì)定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

檢測步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL

酶混合物 1 μL N×1 μL

總量 15 μL N×15μL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

白介素1ε(IL1ε)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb100 ul

白介素1ε(IL1ε)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)THEX1 (D2B4) Rabbit mAb100 ul

生長因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)PKM2 (D78A4) XP? Rabbit mAb20 ul

生長因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)PKM2 (D78A4) XP? Rabbit mAb100 ul

生長因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody100 ul

生長因子受體結(jié)合蛋白14(Grb14)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)THEX1 (D66A11) Rabbit mAb300 ul

生長因子受體結(jié)合蛋白14(Grb14)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb100 ul

生長因子受體結(jié)合蛋白14(Grb14)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb300 ul
布氏布氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒四聚乙醛（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman FSH(Follicle-Stimulating Hormone) ELISA Kit

異丙甲草胺（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman LTF(Lactoferrin) ELISA Kit

甲霜靈（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman LH(Luteinizing Hormone) ELISA Kit

甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml,u=4%）48T/96THuman TSH(Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit

甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.00mg/ml,基體：甲醇）48T/96THuman IGFBP-5(Insulin-like growth factor-binding protein 5) ELISA Kit

甲氧滴滴涕（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman MUC-1(Mucin-1) ELISA Kit

甲氧?。?biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman CALM1(Calmodulin) ELISA Kit

滅草?。?biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman sRAGE(Solube Receptor for Advanced Glycation End product) ELISA Kit

滅多威（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman GFAP(Glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit

煙嘧磺隆（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman MBP/MBL(Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) ELISA Kit

戊硫醇（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman IgA(Immunoglobulin A) ELISA Kit

甲酸銨（色譜級(jí)）48T/96THuman IgE(Immunoglobulin E) ELISA Kit

Amberlite IR-120陽離子交換樹脂（鈉型）48T/96THuman IgG(Immunoglobulin G) ELISA Kit

乙酸戊酯（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman IgM(Immunoglobulin M) ELISA Kit

丙烯酸（HPAA）（標(biāo)準(zhǔn)品）48T/96THuman PR-3(Proteinase-3) ELISA Kit

97%25g100g13111000.130/220ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)rudimental bovine serum albumin checkup

原釩鈉 質(zhì)量規(guī)格：>96%,BR Sodium orthovanadate

組織因子(TF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 LY86 / MD-16 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷用于水、廢水和食品中糞大腸菌群以及大腸菌群的檢測計(jì)數(shù)

human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit  人蝸牛同源物2CAS號(hào)：胎蛋白纖維素合成酶檢測試盒1mgHuman/人Elisa試盒328698

97%1g5mg13111000.122/0.510ul手動(dòng)單道移液器(Eppendorf)coagulation factor XI antigen

 白介素31(IL31)重組蛋白英文名稱：Recombinant Interleukin 31 (IL31)

組織型纖溶酶原激活因子(tPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 EIF-5A / EIF5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)

Human golgi protein 73,GP73 ELISA Kit  人高爾基蛋白73CAS號(hào)：前列腺特異抗原類胡蘿卜素檢測試盒250UHuman/人Elisa試盒328698

98%20mgtransglutaminase 2C polypeptide,TGM2 ELISA Kit

 NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)人皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基

標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品, 四氫鴨腳木堿

98%20mgTGFα ELISA Kit

吡哆-L-谷氨二鉀鹽[藥物研究配體] 質(zhì)量規(guī)格：藥物研究配體 Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt

標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品, Taxiphyllin

98%20mgTGFβ1 ELISA kit

 桿菌屬 Lactobacillus sp.mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞

標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品, Taxifolin 3Oxyloside
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。