北京旭鑫盛科儀器設(shè)備有限公司
主營產(chǎn)品: 研磨機
國產(chǎn)振動球磨儀-旭鑫盛科-全自動振動球磨儀
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組織研磨儀采用垂直振蕩,使研磨管內(nèi)冷凍的樣品與研磨球型號碰撞,產(chǎn)生的剪切力和撞擊力使組織完全破碎。
組織研磨儀的使用方法如下:1.需將待測的樣品經(jīng)過簡單切碎稱重后,放入50ml離心管中。2.然后加入兩粒15mm研磨珠,在高通量組織研磨儀上以1000 r/min研磨3分鐘,即可得到初步的農(nóng)殘檢測樣品。3.再經(jīng)過提取液分離、鹽類除水和吸附劑除雜之后,就可以得到清液,用于進一步的檢測分析。
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樣品研磨
1) 取1g的樣品放入2ml樣品管中;
2) 加入1-2粒5mm研磨珠;
3) 加入1ml的CTAB 抽提液;
4) 將加有樣品的樣品管放入高通量組織研磨儀的適配器中,蓋好;
5) 將研磨轉(zhuǎn)速調(diào)到1800,設(shè)定研磨時間為90秒(可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié),此數(shù)據(jù)是以銀杏為樣本得出);
6) 啟動研磨儀對樣品進行研磨(根據(jù)不同的樣品,本身性質(zhì)不同,需要對研磨頻率和研磨時間進行適當?shù)恼{(diào)整)。
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DNA的粗提
1) 將高通量組織研磨儀研磨好的樣品取出于65℃水浴45min,中途間隔(輕柔)振蕩三次混勻;
2) 冷卻后加入等體積:易戊醇(24:1),輕柔顛倒混勻使乳化10min;
3) 7000g-8000g離心10min(18-20℃);
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中;
5) (根據(jù)需要可用氯放:易戊醇如上法重復抽提一次,吸取上清);
6) 加入與上清液等體積
7) 離心法沉淀DNA;
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上,用Tip頭吸干乙醇;
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次;
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明,不要過度干燥;
11) 用50μlTE溶解沉淀,可用65℃水浴助溶,DNA粗提物可用于粗略PCR等。
利用高通量組織研磨儀對要進行DNA提取的植物樣品研磨的好處在于:研磨過程中,不會對植物組織造成破壞,可根據(jù)需要選擇干磨、濕磨及冷凍研磨,封閉式的樣品管,避免樣品交叉污染。