上海博湖生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: PCR檢測(cè)試劑盒, elisa試劑盒, 菌種, 科研抗體, 細(xì)胞
博湖大鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒
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上海市閔行區(qū)
主營(yíng)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱:大鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒
英文名稱:Rat myeloperoxidase, MPO Elisa Kit
貨號(hào):BH-H8739
規(guī)格:48T/96T
ELISA檢測(cè)概述
ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
自備物品:
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
大鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請(qǐng)避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人腎系膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL蒙脫石(標(biāo)準(zhǔn)品)Montmorillonit質(zhì)量規(guī)格:鑒別
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 L1210(白血病細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0901佛手柑素;香檸檬素;佛手柑亭;香檸檬亭(標(biāo)準(zhǔn)品)Bergamottin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)Ropivacaine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定
SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 番石榴苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Guaijaverin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人羊膜細(xì)胞;WISH恩曲他濱(標(biāo)準(zhǔn)品)Emtricitabine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)卡維地洛-甲基-d3Carvedilol-methyl-d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
Jurkat77細(xì)胞,人T瘤細(xì)胞Jurkat亞系 615小鼠癌瘤株,Ca761細(xì)胞 牛腦垂體提取物BPE卡維地洛β-D-葡萄糖苷酸(mixture of diasteromers)Carvedilol β-D-Glucuronide (mixture of diasteromers)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
NCI-H358(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)-1-苯乙醇(>98.0%(GC))(S)-(-)-2-Methyl-1-butanol質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
C2C12(小鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 T-103B I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞;MGC803-GFP(S)-(+)-4-甲基-1-(>98.0%(GC))(S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC))(S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)
大鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒IL1A Protein Human 重組人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天門冬酰胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-N-beta-Trityl-L-asparagine
PC-3M-IE8(人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2 Lec1(卵巢細(xì)胞)N-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基 -L-天門冬酰胺 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-Asn-(Xan)-OH
CL-0244WISH(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Boc-L-天冬氨酸 4-芐酯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-L-Asp(OBzl)-OH
SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Boc-L-天冬氨酸 4-環(huán)己酯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-L-Asp(OcHex)OH
人骨骼肌細(xì)胞cDNAHSkMC cDNABOC-β-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRBoc-?-Ala-OH
PLA2G2A Others Human 人 PLA2G2A / PLA2B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-去甲氧基-4-氯代奧美拉唑硫化物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口4-Desmethoxy-4-chloro Omeprazole Sulfide
人十二脂腸腺癌;HuTu-804-去甲氧基-4-氯代奧美拉唑質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口4-Desmethoxy-4-chloro Omeprazole
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)(HMSC-bm)(5×105)外消旋4-去甲氧基-4-硝基奧美拉唑質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口rac 4-Desmethoxy-4-nitro Omeprazole
CM-R032大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL奧美拉唑砜N-氧化物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Omeprazole Sulfone N-Oxide
小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1 小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(R)-(-)-2-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(R)-(-)-2-Octanol
應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)