上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: PCR檢測(cè)試劑盒, ELISA試劑盒, 細(xì)胞, 科研抗體, 中藥標(biāo)準(zhǔn)品
邦景羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
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陳麗
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所在地區(qū)
上海市閔行區(qū)
主營(yíng)產(chǎn)品
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Bunostomum trigonocephalum
貨號(hào):BJP63374
分類:熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),絕對(duì)定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
4-乙基間苯二酚 2896-60-8鹽酸普萘洛爾干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
4-乙基間苯二酚 2896-60-8美他多辛干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
硒代-DL-胱氨酸 2897-21-4D-焦谷氨酸干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
(二基膦)氯化金 28978-09-8托拉塞米雜質(zhì)干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
(二基膦)氯化金 28978-09-8奈達(dá)鉑干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
間甲苯基溴化鎂溶液 28987-79-33-吲哚甲酸(鹽酸托烷司瓊雜質(zhì))干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1 M in Tetrahydrofuran
TRAM-34 289905-88-0塞曲司特基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥98%
L-色氨 2899-29-8氫溴酸西酞普蘭轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
L-色氨 2899-29-8利拉萘酯轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
吡 290-37-9馬來酸氟伐沙明轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%
吡 290-37-9苯甲酸利扎曲普坦轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%
吡 290-37-9 二乙酰氨乙酸乙二胺轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%
3-溴苯磺酰氯 2905-24-0氟伐他汀鈉轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
3-溴苯磺酰氯 2905-24-0對(duì)氨基酚轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
3,4-二磺酰氯 2905-30-8硫氧嘧啶轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
羊仰口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒電介錳HEPACAM2 肝細(xì)胞粘附分子2抗體 100 ul
氧化錳(Ⅳ)HEXDC 氨基己糖苷酶D抗體 300 ul
碳酸亞錳HHLA2 HHLA2蛋白抗體 100 ul
黑錳礦KIAA1576/VAT1L 囊泡胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體 20 ul
酸性磷酸錳BOLA1 BOLA1蛋白抗體 100 ul
醋酸錳BOLA2 BOLA2蛋白抗體 300 ul
洛瑟爾氏鹽BPIL1 殺菌通透性增加蛋白樣1抗體 100 ul
鈉臭BPIL2 殺菌/通透性增加蛋白樣2抗體 100 ul
卡氏試液BPIL3 殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 100 ul
卡爾費(fèi)休試劑(含吡啶)BRD1 BRD1蛋白抗體 100 ul
酸鈉BRP44 腦蛋白44抗體 20 ul
二苯基二氮烯BRP44L 腦蛋白44樣蛋白抗體 100 ul
對(duì)溴氯苯BRPF3 BRPF3蛋白抗體 100 ul
對(duì)溴聯(lián)苯LMO2 T淋巴細(xì)胞易位蛋白2抗體 100 ul
六苯并苯BTNL2 嗜乳脂蛋白樣2抗體 100 ul