客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱(chēng)：腺伴隨病毒探針?lè)晒舛?/font>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)

英文名稱(chēng)：Adeno-associated Virus(AAV)

貨號(hào)：BJP63234

分類(lèi)：熒光定量PCR試劑盒

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

染料法

探針?lè)?

可進(jìn)行相對(duì)，絕對(duì)定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針?lè)ǎ?/font>

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。

檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL

酶混合物 1 μL N×1 μL

總量 15 μL N×15μL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

(R)-(+)-3-羥基哌啶鹽酸鹽 198976-43-1人生長(zhǎng)激素釋放抑制因子抗胰島素受體抗體(AIRA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

FMOC-L-4-氨酸 199006-54-7甲?；松L(zhǎng)激素纖維介素蛋白(FGL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

FMOC-L-4-氨酸 199006-54-7腺苷鈷胺載脂蛋白A1(APOA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

D-阿卓糖 1990-29-0前列地爾蛋白激酶R(PKR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%

D-阿卓糖 1990-29-0氟尿苷抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w(ANEA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%

Balaglitazone 199113-98-9次亮氨酰氨基肽酶(LAP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥98%

BOC-N-甲基-D-氨酸 19914-38-6前列腺素D2合成酶(PGD2S)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

BOC-N-甲基-D-氨酸 19914-38-6科博肽葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

BOC-N-甲基-D-氨酸 19914-38-6鮭降鈣素轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

O-6-芐基鳥(niǎo)嘌呤 19916-73-5輔酶A前列環(huán)素(PGI2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

O-6-芐基鳥(niǎo)嘌呤 19916-73-5D-核糖橋粒芯糖蛋白1(DSG1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

(S)-1-Boc-(3-Hydroxymethyl)pyrrolidine 199174-24-8肌苷鞘磷脂(SPH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

(S)-1-Boc-(3-Hydroxymethyl)pyrrolidine 199174-24-8細(xì)胞色素C缺血修飾白蛋白(IMA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

(S)-1-Boc-3-氨甲基吡咯烷 199175-10-5乙酰半胱氨酸酸性磷酸酶1(ACP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%

(S)-1-Boc-3-氨甲基吡咯烷 199175-10-5N-乙酰-L-酪氨酸胎兒血紅蛋白(HBF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%
腺伴隨病毒探針?lè)晒舛?/font>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)N-叔丁氧羰基-4-羥基-L-脯氨酸USP3  去泛素化酶3抗體 100 ul

N-Boc-N'-硝基-L-精氨酸ATXN3L  小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體 100 ul

N-叔丁氧羰基-L-絲氨酸Endomucin  內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體 20 ul

N-叔丁氧羰基-D-絲氨酸KLK3/Prostate Specific Antigen  激肽釋放酶3/舒血管素3抗體 100 ul

N-叔丁氧羰基-D-色氨酸H5N1-H5  禽流感H5亞型全病毒抗體 500 ul

N-叔丁氧基羰基-L-纈氨酸Newcastle disease virus  雞新城疫疫苗（雞瘟4型混合病毒）抗體 100 ul

N-叔丁氧羰基-D-纈氨酸CD3 epsilon  CD3抗體 20 ul

N-CBZ-L-氨酸CD3 epsilon  CD3抗體 100 ul

N-CBZ-D-氨酸CD4  CD4抗體 100 ul

N-芐氧羰基-L-谷氨酰胺CD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體 100 ul

N-芐氧羰基-L-天冬酰胺CD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體 20 ul

N-羰芐氧基-L-苯氨酸CD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體 100 ul

N-芐氧羰基-D-苯氨酸AFP  甲胎蛋白AFP抗體 100 ul

N-BOC-L-谷氨酸CD83  CD83抗體 20 ul

N-芐氧羰基-D-谷氨酸CD73/NT5  CD73抗體 1 ml
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱(chēng)、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針?lè)ǎ?，可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。