產(chǎn)品名稱：衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

英文名稱：Actinomyces israelii

貨號(hào)：BJP63230

分類：熒光定量PCR試劑盒

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法

可進(jìn)行相對(duì)，絕對(duì)定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL

酶混合物 1 μL N×1 μL

總量 15 μL N×15μL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。

2-氟-3-胺 1978-33-2氯霉素X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

5-甲基異惡唑-3-羧酸甲酯 19788-35-3卡那霉素染色質(zhì)域解旋酶DNA結(jié)合蛋白3(CHD3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

5-甲基異惡唑-3-羧酸甲酯 19788-35-3羅紅霉素顆粒酶M(GZMM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

4-氯甲基-3,5-二甲基異噁唑 19788-37-5克拉霉素抗核膜糖蛋白210抗體(AGPA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

4-氯甲基-3,5-二甲基異噁唑 19788-37-5柔紅霉素蛋白激酶Cδ(PKCδ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2',5'-二氟苯乙酮 1979-36-8鹽酸表柔比星血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGFAB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2',5'-二氟苯乙酮 1979-36-82-乙基己酸膽囊收縮素B受體(CCKBR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2',5'-二氟苯乙酮 1979-36-8對(duì)甲半胱氨酸蛋白酶抑制劑A(CSTA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

吡啶-2-酸 197958-29-5頭孢替安基質(zhì)細(xì)胞衍生因子2(SDF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)95%

2-氨基-4-氯吡啶 19798-80-2莫匹羅星胸腺因子(TF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

2-氨基-4-氯吡啶 19798-80-2磷霉素鈉胎盤蛋白13(PP13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

2-溴-6-氨基吡啶 19798-81-3酪蛋白核糖核酸抑制因子(RI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2-溴-6-氨基吡啶 19798-81-3可溶性淀粉絲裂原激活蛋白激酶支架蛋白1(MAPKSP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

4,6-二羥基-2-甲硫基嘧啶 1979-98-2尿激酶早期生長(zhǎng)應(yīng)答因子3(EGR3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

4,6-二羥基-2-甲硫基嘧啶 1979-98-2凝血酶（牛血）細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
衣氏放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書N-乙酰-L-異白氨酸Glutaminase  谷氨酰胺酶抗體 100 ul

N-乙酰-L-賴氨酸Visfatin-1(CT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體) 20 ul

N-乙酰-L-α-氨酸Tissue factor/CD142/F3  組織因子抗體 100 ul

D-α-N-乙酰氨基-β-吲哚酸Galc  半乳糖腦苷脂酶抗體 100 ul

N-乙酰-D-白氨酸AEV polyprotein  禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 100 ul

N-乙酰-L-脯氨酸EBNA 3B  EB病毒核抗原-3B抗體 1 Kit

N-乙酰-D-脯氨酸ADFP  脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體 100 ul

鹽酸-3-O-乙酰左旋肉堿LMP2A  EB病毒LMP-2A蛋白抗體 300 ul

3-甲基-2-氧丁酸鈣鹽ADAM2  去整合素樣金屬蛋白酶2抗體 100 ul

9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯MLCK  肌球蛋白輕鏈激酶抗體 100 ul

四甲基脲六氟磷酸酯Acetyl-Histone H4(K5)  乙?；M蛋白H4抗體 1 Kit

N-芐氧羰基-L-纈氨酸Acetyl-Histone H4(K16)  乙?；M蛋白H4(K16)抗體 100 ul

D-異白氨酸AFP  甲胎蛋白抗體 100 ul

β-胺酸乙酯鹽酸鹽AEV(Avian Encephalomyelitis virus)  禽腦脊髓炎病毒AEV抗體 100 ul

L-胺酰胺鹽酸鹽ADAM17/CD156b  腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶 100 ul