邦景人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒
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產(chǎn)品名稱:人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:5-LO/LOX
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學研究,產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
丙酰紫草素英文名稱:Propionyl Shikonin規(guī)格:HPLC≥98%10mg/支人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA Kit
乙酰紫草素英文名稱:Acetyl Shikonin規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA Kit
去氧紫草素英文名稱:Deoxyshikonin規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人白血病抑制因子(LIF)ELISA Kit
藜蘆胺(藜蘆堿)英文名稱:Veratramine (Li Lujian)規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA Kit
藜蘆定英文名稱:Veratridine規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人百日咳毒素(PT)ELISA Kit
原藜蘆堿A英文名稱:Protoveratrine A規(guī)格:HPLC≥98% 5mg/支人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA Kit
芥芬胺、蒜藜蘆堿、介藜蘆胺英文名稱:Jervine and jervine and jervine規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA Kit
附子靈英文名稱:Fuziline規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA Kit
苦蒿素英文名稱:Bitter artemisin規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA Kit
尼奧林,雪上一枝蒿乙素英文名稱:Neh Olin bullatine B規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA Kit
大戟因子?L3英文名稱:Euphorbia factor? L3規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人膀胱癌抗原(UBC)ELISA Kit
大戟因子L1英文名稱:Euphorbia factor L1規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA Kit
水楊酸英文名稱:Salicylic acid規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人包蟲抗體IgG ELISA Kit
絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲英文名稱:Gypsophila saponin 3-O- beta -D- glucuronic acid methyl規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA Kit
靈芝酸A英文名稱:Ganoderic acid A規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit
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1-酰氨基-羥基蒽醌英文名稱: 1-Acetamido-hydroxyanthraquinone CAS:73232 分子式:C16H11NO4 分子量:281.27
N-酰醇胺英文名稱: N-Acetylethanolamine CAS:142-26-7 分子式:C4H9NO2 分子量:103.12
人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒4-酰氨基環(huán)己酮英文名稱: 4-Acetamidocyclohexanone CAS:27514-08-5 分子式:C8H13NO2 分子量:155.2
反-酰氨基環(huán)己醇英文名稱: trans-Acetamidocyclohexanol CAS:274890-7 分子式:C8H15NO2 分子量:157.21