邦景豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA檢測試劑盒
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樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品名稱:豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:PⅠCP
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
HPC,hydroxypropylcellulose 低粘度羥丙基纖維素 質量規(guī)格:>98%,BR,單水合物
L(+)Sodiumtartratedihydrate L(+)酒石酸二鈉二水(>98%,BC) 質量規(guī)格:>98%,BR,進分
Pyridoxamine,dihydrochloride 鹽酸吡哆胺(>98%,BC) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Sodiumsalicylate 水楊酸鈉(>99%,USP) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
CAPS,sodiumsalt 3-(環(huán)己氨基)-1-丙磺酸鈉(分子生物學級) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Hematin 血紅素(>95%,BR) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
PEG800 聚乙二醇800 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Quinestrol 炔雌醚;炔雌醇環(huán)戊醚 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
PhosphodiesteraseIfromCrotalusadamanteusVenom 磷酸二酯酶(比活度:>20U/mg,BC) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Propidiumiodide 碘化丙啶(>95%(HPLC),BC) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Sodiumdodecylbenzenesulfonate 十二烷基苯磺酸鈉(>95%,TechGrade) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Sodiumsilicatehydrate 硅酸鈉九水(>98%,BR) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Bluo-Gal 5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR) 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Disodiumhydrogenphosphatedihydrate 磷酸氫二鈉二水 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
NeutralProteasefromBacilluspolymyxa 中性蛋白酶 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Sushi重復含蛋白質連鎖2檢測試劑盒亞 型 IgG 0.25ng/mL~8ng/mL
性別決定區(qū)Y框蛋白9檢測試劑盒亞 型 IgG 0.625ng/mL~20ng/mL
固醇調(diào)節(jié)元件結合蛋白-1C檢測試劑盒亞 型 IgG 125pg/mL~4000pg/mL
腫瘤壞死因子誘導蛋白8樣蛋白2檢測試劑盒亞 型 IgG 0.25ng/mL~8ng/mL
L-型電壓依賴鈣離子通道α1F亞基檢測試劑盒亞 型 IgG 0.3125ng/mL~10ng/mL
8-異構前列腺素F2α檢測試劑盒亞 型 IgG 156.25pg/ml~5000pg/ml
胰島淀粉樣多肽檢測試劑盒亞 型 IgG 3.75pmol/L~120pmol/L
5-羥色胺受體1A檢測試劑盒亞 型 IgG 0.3125ng/mL~10ng/mL
多巴胺受體D2檢測試劑盒亞 型 IgG 0.625ng/mL~20ng/mL
猩紅熱抗體檢測試劑盒亞 型 IgG 0~
猩紅熱檢測試劑盒亞 型 IgG 0~
流行性出血熱抗體檢測試劑盒亞 型 IgG 0~
再生胰島衍生蛋白3α檢測試劑盒亞 型 IgG 62.5pg/mL~2000pg/mL
皮膚衍生肽酶抑制因子3檢測試劑盒亞 型 IgG 0.625ng/mL~20ng/mL
膽色素原脫氨酶檢測試劑盒亞 型 IgG 2.5ng/ml~80ng/ml
雜交瘤細胞;6A2 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
雜交瘤細胞;SU-211-10 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
雜交瘤細胞;S-200-23 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
雜交瘤細胞;S-171 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA檢測試劑盒尿素英文名稱:Urea保存:20℃,避光規(guī)格:50mg嘌呤核苷化酶一抗
麥芽糖英文名稱:Malt sugar保存:20℃,避光規(guī)格:2g浦肯野細胞萎縮相關蛋白1一抗
吉非羅齊英文名稱:Gemfibrozil保存:20℃,避光規(guī)格:100mg凋亡誘導受體PLEKHG5一抗
核黃素鈉英文名稱:Riboflavin sodium phosphate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg蛋白質酶2AB55一抗
4[2(5嗪2酰)英文名稱:4[2 (5 methyl pyrazine 2 benzoyl amino)保存:20℃,避光規(guī)格:50mg棕櫚酰蛋白水解酶2一抗
格列嗪英文名稱:Glipizide保存:20℃,避光規(guī)格:100mg多谷酰結合蛋白1一抗
格列喹英文名稱:Gliquidone保存:20℃,避光規(guī)格:100mg肌動蛋白相關蛋白2/3復合體亞基5一抗
泛鈉英文名稱:Pantothenic acid sodium保存:20℃,避光規(guī)格:100mg蛋白質精亞型2一抗
對羥英文名稱:Phydroxy benzoic acid methyl ester保存:20℃,避光規(guī)格:100mg醇轉移酶2一抗
大豆油英文名稱:Soybean oil保存:20℃,避光規(guī)格:50mg脂酰肌醇結合網(wǎng)格蛋白組裝蛋白一抗
魯米特英文名稱:Aminoglutethimide保存:20℃,避光規(guī)格:50mg絲/蘇蛋白酶1調(diào)節(jié)亞基10一抗
鹽卡特羅英文名稱:Bin Castro hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg細胞色素氧化酶裝配因子PET112一抗
麥芽三糖英文名稱:Three malt sugar保存:20℃,避光規(guī)格:100mg化蛋白激酶C一抗 PKC ε
特布他林英文名稱:Terbutaline sulfate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg對氧酶3一抗
苘麻子英文名稱:Abutilon theophrasti保存:20℃,避光規(guī)格:2g朊蛋白CD230一抗
桃枝英文名稱:Peach branches保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g早老素蛋白1+2一抗
常山英文名稱:Changshan保存:20℃,避光規(guī)格:5g枯草溶菌素轉化酶1抑制劑一抗