邦景豬肺表面活性物質(zhì)相關蛋白A(SP-A)ELISA檢測試劑盒
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樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品名稱:豬肺表面活性物質(zhì)相關蛋白A(SP-A)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:SP-A
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
ChymotrypsinogenA 胰凝乳蛋白酶原A 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Cibacronblue3G-A 汽巴藍 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
DEAEDextran DEAE葡聚糖 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Fluridone 氟啶酮(>98%,植物激素級) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Histamine 組胺(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Iohexol 碘海醇 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
MaltosePhosphorylase5U/mg 麥芽磷酸化酶,硫酸銨懸浮液 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Metribuzin 嗪草酮(>95%,植物激素級) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
MU-alpha-GAL 4-甲基傘形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Mucicacid 粘酸(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
NaphtholAS-MXphosphate 萘酚AS-MX磷酸酯(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Potassiumoxalate,monohydrate 草酸鉀一水(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Sodiumbitartrate,monohydrate 酒石酸氫鈉一水(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Sodiumsulfate,decahydrate 硫酸鈉十水(>99%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
Span*40 司班40 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
γ-生育酚檢測試劑盒亞 型 IgG 1.5ug/mL~48ug/mL
δ-生育酚檢測試劑盒亞 型 IgG 0.625ug/mL~20ug/mL
纖溶酶檢測試劑盒亞 型 IgG 0.3125ng/mL~10ng/mL
N-乙酰神經(jīng)氨酸檢測試劑盒亞 型 IgG 31.25nmol/L~1000nmol/L
末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒亞 型 IgG 0.625ng/mL~20ng/mL
血管抑制素2檢測試劑盒純化方法 affinity purified by Protein A 0.625ng/mL~20ng/mL
后期表達增強T-細胞活化抗原檢測試劑盒亞 型 IgG 56.25pg/mL~1800pg/mL
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白10檢測試劑盒亞 型 IgG 0.25ng/mL~8ng/mL
輕鏈鐵蛋白檢測試劑盒亞 型 IgG 6.25ng/ml~200ng/ml
糖基化CD59檢測試劑盒亞 型 IgG 1.25ng/ml~40ng/ml
鐵蛋白重鏈檢測試劑盒亞 型 IgG 6.25ng/ml~200ng/ml
細胞色素P4502B6檢測試劑盒亞 型 IgG 1.5625ng/mL~50ng/mL
生四烯酸-15-脂加氧酶檢測試劑盒亞 型 IgG 3.125ng/mL~100ng/mL
15-羥基PGD2脫氫酶檢測試劑盒亞 型 IgG 0.625ng/mL~20ng/mL
脂氧合酶同工酶5檢測試劑盒亞 型 IgG 25pg/mL~800pg/mL
小鼠雜交瘤細胞;2F10 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
雜交瘤細胞;S-71 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
雜交瘤細胞;S6-5 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
雜交瘤細胞;1B8 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
豬肺表面活性物質(zhì)相關蛋白A(SP-A)ELISA檢測試劑盒平貝母英文名稱:Fritillaria ussuriensis保存:20℃,避光規(guī)格:5g足細胞表達蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21一抗
丹參英文名稱:Salvia miltiorrhiza保存:20℃,避光規(guī)格:1g孕激素受體一抗
五味子(北五味子)英文名稱:Schisandra (Schisandra chinensis)保存:20℃,避光規(guī)格:1g神經(jīng)細胞突觸蛋白PCLO一抗
木香英文名稱:Mu Xiang保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g11號染色體開放閱讀框73一抗
馬兜鈴英文名稱:Aristolochia保存:20℃,避光規(guī)格:3g血小板衍化生長因子β一抗
廣防已英文名稱:Aristolochia Fangchi保存:20℃,避光規(guī)格:3g血小板衍化生長因子γ一抗
川芎英文名稱:Ligusticum chuanxiong Hort保存:20℃,避光規(guī)格:1g血小板47蛋白一抗
人參英文名稱:Ginseng保存:20℃,避光規(guī)格:1g妊娠相關血漿蛋白A2一抗
薄荷英文名稱:Mint保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g血漿谷羧肽酶一抗
檳榔英文名稱:Betel nut保存:20℃,避光規(guī)格:1gPAPα/β/γ/多聚合酶α/β/γ一抗
紫蘇葉英文名稱:Zi Suye保存:20℃,避光規(guī)格:1g纖溶酶相關蛋白B2一抗
黃連(三角葉黃連)英文名稱:Coptis chinensis (River Ye Huanglian)保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g酪酶PTPδ一抗 蛋白酪酶D受體一抗
益母草英文名稱:Motherwort保存:20℃,避光規(guī)格:1g魚精蛋白2一抗
三尖杉寧英文名稱:Three sharp cedar better alkali保存:20℃,避光規(guī)格:30mgpiwi樣3蛋白一抗
7表10去酰紫杉英文名稱:The 7 table 10 deacetyl taxol保存:20℃,避光規(guī)格:20mgpiwi樣4蛋白一抗
鹽雙胍英文名稱:Phenformin hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病一抗
英文名稱:Aminomethylbenzoic acid保存:20℃,避光規(guī)格:100mg凋亡相關蛋白10一抗