邦景兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒
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產品名稱:兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:t-PA
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,產品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 產品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
免疫球蛋白降解酶S KLH conjugated synthetic peptide derived from human WIG-1/PAG608 (71-120aa) WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-WIG-1/PAG608(3E4)
GTPase-Glo? 檢測試劑盒 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PRMT1 C-terminus WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-PRMT1
辣根過氧化物酶標記 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from mouse PERK around the phosphorylation site of Thr981 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-Phospho-PERK(Thr980)
蛋白激酶抑制劑 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PLK1 (235-280aa) WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-PLK1
蛋白檢測系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from human PTGEs N-terminus WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-PTGEs
P450-Glo? CYP449 檢測試劑盒 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PP1G (270-313aa) WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-PP1Cgamma
蛋白分子量標準 KLH conjugated synthetic peptide derived from human p53R2/RRM2B WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-p53R2/RRM2B
蛋白純化磁珠 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PTEN WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-PTEN/MMAC1(CT)
MagneGST? 蛋白純化系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from human PAFR C-terminus WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-PAFR/PTAFR
GST蛋白純化磁珠 KLH conjugated synthetic peptide derived from human p58ipk WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 Anti-p58ipk/DNAJC3
人成骨肉瘤細胞;MG3 培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
人成骨肉瘤細胞;Saos-2 培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
人膀胱移行細胞癌細胞;T24 培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒(肼基羰基)二茂鐵(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記) 質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記純度:≥98%
二甲亞砜(>99.0%(GC)) 質量規(guī)格:>99.0%(GC)純度:≥98%
1,2,3,4-四氫萘(>98.0%(GC) 質量規(guī)格:>98.0%(GC)純度:≥98%
對茴香醛乙溶液(含乙和) 質量規(guī)格:用于薄層色譜顯色劑純度:≥98%
二甲亞砜-d6 99.9原子%D(>99.0%(GC)) 質量規(guī)格:>99.0%(GC)純度:≥98%
重水 99.8原子%D 質量規(guī)格:99.8原子%D純度:≥98%
3-(三甲基硅基)-1-磺(>98.0%(T)) 質量規(guī)格:>98.0%(T)純度:≥98%
二甲基硒(>98.0%(GC)) 質量規(guī)格:>98.0%(GC)純度:≥98%
四甲基錫(>96.0%(GC)) 質量規(guī)格:>96.0%(GC)純度:≥98%
二二茂鋯(>97.0%(T)) 質量規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥97%
Chirabite-AR[用于核磁共振] 質量規(guī)格:用于核磁共振純度:≥98%
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二)鐠(III)(>98%(T)) 質量規(guī)格:>98%(T)純度:≥98%
三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二)銪(III)(>95%(T)) 質量規(guī)格:>95%(T)純度:≥98%
三(6,6,7,7,8,8,8-七-2,2-二甲基-3,5-辛二基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T)) 質量規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥98%
(S)-(+)-1,1'-聯(lián)萘基-2,2'-雙磷氫酯(>97.0%(T)) 質量規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥98%
(R,R)-(-)-2,3-二(>96.0%(GC)) 質量規(guī)格:>96.0%(GC)純度:≥98%