需自備試劑和器材：

1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2． 自動(dòng)洗板機(jī)。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙 

產(chǎn)品名稱(chēng)：兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：ColⅠ

規(guī)格：96T/48T

特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

實(shí)驗(yàn)步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫

度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見(jiàn)附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，

直接進(jìn)入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

ADP-Glo?激酶檢測(cè)系統(tǒng) + MAPKAPK2 激酶系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from human VEGF-A WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VEGF-A

RET (Y791F) 激酶系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from human VEGF-A WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VEGF-A

VRK2 激酶系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from human VMAT1/VAT1 WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VMAT1/VAT1

ALK4 激酶系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from human Vinculin WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-Vinculin

MARK1 激酶系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from human VEGFB167  WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VEGFB167

PowerPlex? 16單基因座熒光檢測(cè)試劑盒（D7S820) KLH conjugated synthetic peptide derived from human VEGFB WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VEGFB

UDP-Glo? 糖基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)系統(tǒng) + UDP-乙酰葡糖胺 KLH conjugated synthetic peptide derived from human VGF/Nerve growth factor inducible WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VGF/Nervegrowthfactorinducible

ADP-Glo?激酶檢測(cè)系統(tǒng) + TOPK 激酶系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from human VAP1 WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VAP1

WNK1 激酶系統(tǒng) KLH conjugated synthetic peptide derived from mouae VEGFR1 (1162-1200aa) WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VEGFR1/FLT1

維生素B5 KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse VEGFR3 C-terminus WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  Flow-Cyt=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-VEGFR3

人肝細(xì)胞；HL-7702[L-02] 培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，20%

人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701] 培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%

人張氏肝細(xì)胞；Chang liver 培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%

人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞；CCD-1095Sk 培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA檢測(cè)試劑盒磷氫二二水 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR純度：≥98%

中性蛋白酶 質(zhì)量規(guī)格：酶活：20萬(wàn)u/g純度：95%

聚乙二200 質(zhì)量規(guī)格：BR純度：98%

結(jié)晶碳(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR純度：98%

中性氧鋁(BR) 質(zhì)量規(guī)格：BR純度：≥98%

D-酒石(>99%，BC) 質(zhì)量規(guī)格：>99%，BC純度：≥98%

吲哚(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR純度：≥98%

鋰(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR純度：≥98%

油(>98%,BR ) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 純度：97%

四甲基銨(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR純度：≥95%

1-辛磺(>98%,BC ) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC 純度：≥95%

乙鈣一水(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR純度：≥98%

磷三鈣(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR純度：≥98%

DL-硒代蛋(USP) 質(zhì)量規(guī)格：>98%(HPLC),USP純度：98%

蜜二糖 質(zhì)量規(guī)格：>98%,水合物純度：98%

草(>98%，BC) 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BC純度：≥97%
樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。

仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。