應用范圍：血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關液體（本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途）
ELISA檢測概述
      ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。

產(chǎn)品名稱：人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒
英文名稱：Human Heat Shock Protein 70, HSP-70 Elisa Kit
貨號：BH-H7481
規(guī)格：48T/96T
自備物品:
1.     酶標儀（450nm）
2.     高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.     37℃恒溫箱

 人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3． 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請避光保存。
7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
靈芝酸G HPLC≥98% 20mg 人巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒 Human MIP-3β ELISA kit

靈芝烯酸D HPLC≥98% 10mg Ratalcoholdehydrogenase,ADHELISAKit大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

靈芝烯酸E HPLC≥98% 5mg 載玻片細胞αSMA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20

硫秋水仙苷 HPLC≥98% 20mg Mouse5-Nucleotidase,5-ELISA試劑盒小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硫酸氨基葡萄糖 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂蛋白關聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ，英文名： LpPLA2 ELISA Kit

硫酸長春堿 HPLC≥98% 20mg 基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA檢測試劑盒Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit 96T/48T

硫酸長春新堿 HPLC≥98% 20mg 犬凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)試劑盒 Canine thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit

硫酸長春質(zhì)堿 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP3ELISAKIT人胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)規(guī)格：96T/48T

硫酸黃連堿 HPLC≥98% 20mg 化人體RUNX3基因重組表達載體(pcDNA-RUNX3)測序引物對2OD

硫酸金雀花堿 HPLC≥98% 20mg RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISA試劑盒大鼠透明質(zhì)酸結合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
n-Butyl-β-D-fructopyranoside  67884-27-9  中文名：  分子式：C10H20O6    Human plasminogen activator (PLGA) ELISA Kit 人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒

3'-Hydroxygynuramide II  1401093-57-9  中文名：  分子式：C42H83NO6    Humanai-IgEreceptoraibodyELISAKit 人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Senkyunolide S  172723-28-3  中文名：  分子式：C12H16O5    Humandenguefeveraibody,DFELISA試劑盒人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Senkyunolide R  172549-37-0  中文名：  分子式：C12H16O5    組織JNK3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Senkyunolide E  94530-83-3  中文名：  分子式：C12H12O3    Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒異海松烯,二醇 HPLC≥98% 5mg Rat macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒

貝殼杉烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg Rat macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒

羥基漿果赤霉素 III HPLC≥98% 5mg Rat macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 大鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒

甲氧基羰基beta咔啉 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒

脫羧氧代茶酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒

乙酰基掬萬壽局素 A HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒

,貝殼杉烷二醇 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒

,,三羥基齊墩果烯酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒

,,三鄰甲基鞣花酸 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒

,脫氫維酮 HPLC≥98% 5mg Rat maix metalloproteinase 7 (MMP-7) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒
Thevebioside  中文名：  分子式：C36H56O13    生成素-2   英文名稱：   Angiopoietin-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ANG2

Tetrahydrolachnophyllum lactone  中文名：  分子式：C10H14O2    增殖誘導配體   英文名稱：   a proliferation-inducing ligand   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   APRIL

Tetraethyl ranelate  中文名：  分子式：C20H26N2O8S    水通道蛋白-4   英文名稱：   Aquaporin-4   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AQP-4

Tetracycline  中文名：四環(huán)素  分子式：C22H24N2O8    乙酰膽堿受體抗體   英文名稱：   ai-acetylcholine receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AChR-Ab

Tetracaine hydrochloride  中文名：鹽酸丁卡因  分子式：C15H25ClN2O2    環(huán)0酸腺苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cAMP

操作步驟:
1.        標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2.         加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.         配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.         溫育：操作同3。
8.         洗滌：操作同5。
9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.     測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。