需自備試劑和器材：

1． 標準規(guī)格酶標儀。

2． 自動洗板機。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙 

產(chǎn)品名稱：大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA檢測試劑盒

英文名稱：HIF-1α

規(guī)格：96T/48T

特點：靈敏性高、特異性強、重復性好

用途:科研實驗等領域科學研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等

實驗步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫

度達到 98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復，

直接進入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

Calconcarboxylic acid分子式：C21H14N2O7S分子量：438.41  現(xiàn)貨促銷   VEGFR-3/FLt-4  血管內皮細胞生長因子受體-3（多肽

鈣紅，鈣指示劑，鈣羧 3-羥基-(2-羥基-磺基-萘基)偶氮-萘羧 2-羥基-(2-羥基-磺基-萘基偶氮)-萘  現(xiàn)貨促銷   Vimentin  波形蛋白（抗原

鈣羧指示劑   37375  現(xiàn)貨促銷   VIP (Vasoactive Intestinal peptide

Calconcarboxylic acid分子式：C21H14N2O7S分子量：438.41  現(xiàn)貨促銷   Visfatin-1 (PBEF1

鈣紅，鈣指示劑，鈣羧 3-羥基-(2-羥基-磺基-萘基)偶氮-萘羧 2-羥基-(2-羥基-磺基-萘基偶氮)-萘  現(xiàn)貨促銷   Visfatin-1 (PBEF1

鈣羧指示劑   37375  現(xiàn)貨促銷   VSIG4 (V-set and immunoglobulin domain-containing protein 4

Calconcarboxylic acid分子式：C21H14N2O7S分子量：438.41  現(xiàn)貨促銷   VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein

鈣紅，鈣指示劑，鈣羧 3-羥基-(2-羥基-磺基-萘基)偶氮-萘羧 2-羥基-(2-羥基-磺基-萘基偶氮)-萘  現(xiàn)貨促銷   VTG(vitellogenin

鉍試劑Ⅰ   10721  現(xiàn)貨促銷   VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing

Bismuthiol I分子式：C2H2N2S3分子量：150.25  現(xiàn)貨促銷   VWF (Von Willebrand Factor

2,5-二巰基,3，4-硫代二氮唑，二硫醇硫代二氮唑，二巰基噻二唑，2,5-二巰基噻二唑,二硫基硫代二唑，2,5-二巰基-硫,4-二氮茂  現(xiàn)貨促銷   WIG-1(wtp53-induced gene 1

鉍試劑Ⅰ   10721  現(xiàn)貨促銷   WNK4(Ser/Thr-protein kinase WNK4; protein kinase with no lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4

Bismuthiol I分子式：C2H2N2S3分子量：150.25  現(xiàn)貨促銷   Wnt1  信號通路Wnt1抗原

2,5-二巰基,3，4-硫代二氮唑，二硫醇硫代二氮唑，二巰基噻二唑，2,5-二巰基噻二唑,二硫基硫代二唑，2,5-二巰基-硫,4-二氮茂  現(xiàn)貨促銷   WWOX (WW domain-containing oxidoreductase

鉍試劑Ⅰ   10721  現(xiàn)貨促銷   XAF1(XIAP-associated factor 1
大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA檢測試劑盒瑞格列奈規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

鹽伐昔韋規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

阿佐塞米規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

鹽尼莫司汀規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

L-那格列奈規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

順式那格列奈規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

奧美拉唑規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

異環(huán)磷酰化合物Ⅲ 規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

鹽地匹福林規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

鹽地匹福林前體規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

替尼泊苷規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

替尼泊苷前體規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

鹽伊立替康規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

鹽貝那普利規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

噴昔韋規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝
樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。

仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。