上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: PCR檢測試劑盒, ELISA試劑盒, 細(xì)胞, 科研抗體, 中藥標(biāo)準(zhǔn)品
邦景大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA檢測試劑盒
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所在地區(qū)
上海市閔行區(qū)
主營產(chǎn)品
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品名稱:大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:17-KS
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫
度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),
直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
需自備試劑和器材:
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應(yīng)加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
速激肽受體1(TACR1)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Tachykinin Receptor 1 (TACR1)
速激肽受體2(TACR2)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Tachykinin Receptor 2 (TACR2)
酸性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1)
酸性磷酸酶1(ACP1)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Acid Phosphatase 1 (ACP1)
酸性葡糖苷酶α(GαA)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)
髓過氧化物酶(MPO)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Myeloperoxidase (MPO)
髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(MOG)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)
髓鞘型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP8)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin (FABP8)
髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (TREM1)
髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2)
胎盤堿性磷酸酶(ALPP)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)
肽酶D(PEPD)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Peptidase D (PEPD)
肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)
碳酸酐酶Ⅰ(CA1)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Carbonic Anhydrase I (CA1)
糖蛋白130(gp130)重組蛋白 現(xiàn)貨促銷 Recombinant Glycoprotein 130 (gp130)
大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA檢測試劑盒灰黃霉素規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
頭孢拉定規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
頭孢哌雜質(zhì)A規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
克拉維規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
舒巴坦規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
頭孢羥氨規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
林可霉素規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
甲砜霉素規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
雙氫甘氨規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
α-對羥基甘氨規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
氯霉素二醇物規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
青霉素規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
乙酰規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝
青霉素酶規(guī)格:96T/48T試劑盒組裝/原裝