需自備試劑和器材：

1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2． 自動(dòng)洗板機(jī)。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙 

產(chǎn)品名稱：小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱：LR/Ob-R

規(guī)格：96T/48T

特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

實(shí)驗(yàn)步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫

度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，

直接進(jìn)入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

谷氨酸受體2C抗體（N端）PSMC6(Proteasome 26S subunit ATPase 6)  ELISA KitAlias: PSMC6ELISAKitReactivity: HumanRange: 31.2-2000pg/mlSensitivity: 18.75pg/ml

神經(jīng)肽Y抗體PSMD10 ELISA KitAlias: PSMD10ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體PSMD12 ELISA KitAlias: PSMD12ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

谷氨酸受體2B抗體PSMD11 ELISA KitAlias: PSMD11ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

神經(jīng)纖毛蛋白2抗體PSMD14(26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 14)  ELISA KitAlias: PSMD14ELISAKitReactivity: HumanRange: 15.6-1000pg/mlSensitivity: 9.375pg/ml

谷氨酸受體2D抗體PSMB2 ELISA KitAlias: PSMB2ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

原癌基因N-Ras抗體PSMD13 ELISA KitAlias: PSMD13ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

蛋白激酶錨定蛋白抗體PSMB3 ELISA KitAlias: PSMB3ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體PSMD2 ELISA KitAlias: PSMD2ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

核小體組裝蛋白1抗體PSMB6 ELISA KitAlias: PSMB6ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

核受體輔助抑制因子1抗體PSMD3 ELISA KitAlias: PSMD3ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白抗體PSMD5 ELISA KitAlias: PSMD5ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

類固醇受體激活蛋白2抗體PSMB7 ELISA KitAlias: PSMB7ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

磷酸化2型神經(jīng)纖維瘤抗體PSMC2(Proteasome 26S subunit ATPase 2) ELISA KitAlias: PSMC2ELISAKitReactivity: HumanRange: 15.6-1000pg/mlSensitivity: 9.375pg/ml

磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體CECR1(Adenosine deaminase CECR1) ELISA KitAlias: CECR1|AdenosinedeaminaseCECR1|Cateyesyndromecriticalregionprotein1|ADA2|ADGF|IDGFLELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA檢測(cè)試劑盒毛蕊異黃酮Calycosin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 20575-57-9 分 子 式: C16H12O5 分 子 量: 284.26

亮抑酶肽溶液(lepueptin,1mg/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

扶桑甾醇中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量: 儲(chǔ)存條件:  2-8℃檢測(cè)方法:  HPLC≥98%來(lái)源:  扶桑

2,3,23-三羥基-12-齊墩果烯-28-酸Olean-12-en-28-oicacid, 2,3,23-trihydroxy-, (2a,3a,4a)-對(duì)照藥材CAS NO.: 102519-34-6 分 子 式: C30H48O5 分 子 量: 儲(chǔ)存條件:  2-8℃檢測(cè)方法:  HPLC≥98%

二乙酸長(zhǎng)葉九里香內(nèi)酯二醇酯Murrangatin diacetate對(duì)照藥材CAS NO.: 51650-59-0 分 子 式:  分 子 量: 儲(chǔ)存條件: 2-8℃檢測(cè)方法: HPLC≥98%

土大黃苷Rhaponticin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 155-58-8 分 子 式: C21H24O9 分 子 量: 420.41

乙酸六棱菊亭酯Artemetin acetate對(duì)照藥材CAS NO.: 95135-98-1 分 子 式: C28H39N2O4As.C2H4O2 分 子 量: 602.59382儲(chǔ)存條件:  2-8℃檢測(cè)方法:  HPLC≥98%

牡荊油Agnuside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 11027-63-7 分 子 式: C22H26O11 分 子 量: 466.44儲(chǔ)存條件:  2-8℃檢測(cè)方法:  HPLC≥98%
樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。

仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。