需自備試劑和器材：

1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2． 自動洗板機(jī)。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙 

產(chǎn)品名稱：小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA檢測試劑盒

英文名稱：PL-A2

規(guī)格：96T/48T

特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

用途:科研實(shí)驗等領(lǐng)域科學(xué)研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

實(shí)驗步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫

度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，

直接進(jìn)入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

21號染色體開放閱讀框25抗體SCRG1(Scrapie responsive protein 1) ELISA KitAlias: scrapieresponsiveprotein1|SCRG1|SCRG1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

CD44抗體HGS(Hepatocyte growth factor-regulated tyrosine kinase substRate) ELISA KitAlias: HGS|HRS|Proteinpp110|ZFYVE8ELISAKitReactivity: HumanRange: 23.438-1500pg/mlSensitivity: 14.063pg/ml

9號染色體開放閱讀框114抗體AP12(Apelin 12) ELISA KitAlias: AP12ELISAKitReactivity: HumanRange: 31.25-2000pg/mlSensitivity: 18.75pg/ml

CD8β鏈（CD8-β）抗體calprotectin ELISA KitAlias: proteinMRP-126|S100A9|S100A12ELISAKitReactivity: HumanRange: 15.625-1000ng/mlSensitivity: 9.375ng/ml

6號染色體開放閱讀框1抗體ACCPA(anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA KitAlias: ACCPAELISAKitReactivity: HumanRange: 1.563-100ng/mlSensitivity: 0.938ng/ml

22號染色體開放閱讀框36抗體Thrombin ELISA KitAlias: ThrombinELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

22號染色體開放閱讀框9抗體LPS IgG(lipopolysaccharide IgG) ELISA KitAlias: EndocabIgGELISAKitReactivity: HumanRange: 1.563-100ng/mlSensitivity: 0.938ng/ml

腫瘤高表達(dá)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白抗體SCRG1(Scrapie responsive protein 1) ELISA KitAlias: scrapieresponsiveprotein1|SCRG1|SCRG1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

9號染色體開放閱讀框117抗體IL-12(p35)(Interleukin 12 p35) ELISA KitAlias: Interleukin12p35ELISAKitReactivity: HumanRange: 31.25-2000pg/mlSensitivity: 18.75pg/ml

6號染色體開放閱讀框120抗體alpha 1 microglobulin ELISA KitAlias: alpha1microglobulinELISAKitReactivity: HumanRange: 78.125-5000ng/mlSensitivity: 46.875ng/ml

CD73抗體LAMTOR1(Ragulator complex protein LAMTOR1) ELISA KitAlias: LAMTOR1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

神經(jīng)細(xì)胞粘附分子CALL抗體HAV-IgM(hepatitis A virus-Immunoglobulin M) ELISA KitAlias: HAV-IgMELISAKitReactivity: Human

6型膠原蛋白α5抗體MYEF2(myelin expression factor 2) ELISA KitAlias: MEF-2|MyEF-2|MST156|KIAA1341ELISAKitReactivity: HumanRange: 31.25-2000pg/mlSensitivity: 18.75pg/ml

接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體HEV-IgM(hepatitis E virus-Immunoglobulin M) ELISA KitAlias: HEV-IgMELISAKitReactivity: Human

CD24抗體SCRG1(Scrapie responsive protein 1) ELISA KitAlias: scrapieresponsiveprotein1|SCRG1|SCRG1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA檢測試劑盒鹽酸強(qiáng)力霉素Doxycycline hyclate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 24390-14-5 分 子 式: C22H24N2O8.HCl 分 子 量: 480.90

磷酸緩沖鹽粉劑(1×PBS,無鈣鎂)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

巴卡亭IIIBaccatine III中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 27548-93-2 分 子 式: C31H38O11 分 子 量: 586.62682熔點(diǎn):  229-234比重:  1.38儲存條件:  2-8℃檢測方法:  HPLC≥98%

蠟果楊梅酸 BOlean-12-en-28-oic acid,27-[[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1- oxo-2-propenyl]oxy]-3-hydroxy-,(3a)- 對照藥材CAS NO.: 55497-79-5 分 子 式: C39H54O7 分 子 量: 634.84186

波棱酮Herpetone化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 951677-22-8 分 子 式: C29H30O9 分 子 量: 522.5431儲存條件:  2-8℃外觀:  Powder

西紅花苷Crocin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 42553-65-1 分 子 式: C44H64O24 分 子 量: 976.96

異粉防己堿N-2'-氧化物Berbaman, 6,6',7,12-tetramethoxy-2,2'-dimethyl-, 2'-oxide化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 70191-83-2 分 子 式: C38H42N2O7 分 子 量: 638.74928

(±)-松屬素Pinocembrin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 68745-38-0 分 子 式: C22H16O5 分 子 量: 360.35944
樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。

仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。