人Y染色體（SRY）探針法熒光定量PCR試劑盒本產(chǎn)品是根據(jù) PCR 原理開發(fā)，它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增 SRY 基因。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

使用方法：

一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。

2. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要做 N+2 個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加 10μL 人 Y 染色體性別決定區(qū)（SRY）PCR 陽性對照的 100 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后 得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置PCR 反應(yīng)（40μL 體系）

對 N+2 個(gè)樣品，在PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對照和一個(gè) PCR 陰性對照，故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè)PCR 管中分別加入下列成分：

人Y染色體性別決定區(qū)（SRY）PCR試劑盒

實(shí)驗(yàn)操作

1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進(jìn)行）
剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序?yàn)?/span>NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)（擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團(tuán)選擇FAM，淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。