產(chǎn)品名稱： 禽流感病毒H9亞型檢測試劑盒

規(guī)    格： 50T
檢測方法： 實時熒光 PCR

保存方式： 2~8℃

有 效 期： 1年

產(chǎn)    地： 中國

用    途： 僅用于科研實驗

訂購流程：禽流感病毒H9亞型檢測試劑盒

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ELISA常見問題：禽流感病毒H9亞型檢測試劑盒

利用ELISA進行檢驗常見的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。

1、抗原：ELISA抗原有三類：液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。

純度不高可導致試劑盒的特異性不強，合成抗原一般都是多肽抗原，

試劑盒一般為基因重組抗原?？乖兌炔桓?，特異性就不強，

2、抗體特異性和親和力的大小會影響試劑盒的特異性和敏感性

3、酶結(jié)合物，試劑盒的保存時間通常由酶的穩(wěn)定性決定。

最常用的就是辣根過氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。

ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液（PBS）

堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了，因為殘留的PBS會抑制一半的酶活性。

TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應（OPD對機體有突變作用，所以改用TMB）

我們的優(yōu)勢：禽流感病毒H9亞型檢測試劑盒

1，嚴格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴格的質(zhì)控，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性

2，產(chǎn)品不斷優(yōu)化，很好的靈敏度；

3，綜合指標特性，研發(fā)便捷操作的試劑盒；

4，檢測驗證樣本多樣；

5，專業(yè)的研發(fā)團隊為客戶提供個性化的定*務；

6，提供食品安全藥物殘留Elisa試劑盒，以及快檢試劑盒

7，完善專業(yè)的售前售后服務

操作步驟
1  病毒 RNA 的提取
1.1  取已處理的樣品、陰性對照和陽性對照，分別加入裂解液 600 μL，充分顛倒混勻，室溫靜置 3～

5 min。

1.2  將液體吸入吸附柱中（吸附柱要套上收集管，吸取液體時盡量不要吸到懸浮雜質(zhì)，以免離心時 堵塞吸附柱），13000 rpm 離心 30 s。

1.3  棄去收集管中液體，加入 600 μL 洗液，13000 rpm 離心 30 s。

1.4 重復步驟 1.3。

1.5 棄去收集管中液體，13000 rpm 空柱離心 2 min，以除去殘留的洗滌液。

1.6  將吸附柱移入新的 1.5 mL 離心管中，向柱中央加入洗脫液 50 μL，室溫靜置 1 min，13000 rpm

離心 30 s，離心管中液體即為模板 RNA。

2  實時熒光 RT-PCR 操作
設被檢樣品、陰性對照和陽性對照總和為 N，則反應體系配制如下： 試劑 體系



無菌無核酸酶水 2.7（N+1）μL

RT-PCR 反應液 10（N+1）μL

酶混合液 0.4（N+1）μL

熒光探針 1.9（N+1）μL



將以上配制的反應體系充分混勻后，分裝每個反應管中各 15 μL。

分別取 5 μL 模板 RNA，加入相應反應管中，混勻并作好標記，在熒光 PCR 儀上進行以下反應：

45 ℃ 15 min，95 ℃ 1min；95 ℃ 5 s，60 ℃ 35 s，在每個循環(huán)第二步（60℃ 35s）收集熒光信號，共

40 個循環(huán)。（報告基團“FAM”，淬滅基團“None”）。

結(jié)果判定
1 結(jié)果分析條件設定 閾值設定原則：閾值線設定于剛好超過陰性對照擴增曲線的點。不同儀器可根據(jù)儀器噪音

情況進行調(diào)整。

2  結(jié)果描述及判定

陽性對照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴增曲線，陰性對照無 Ct 值并且無特定擴增曲線，實驗結(jié)果成 立；被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴增曲線為 AIV 陽性；被檢樣品 30＜Ct＜37 并出現(xiàn)特定的擴 增曲線，需重新取樣提取 RNA，擴增后進行結(jié)果判定，如仍是可疑，可判定為陽性；被檢樣品 Ct 值≥37 時，超過本方法檢測靈敏度范圍，判定為陰性；對于某些未呈現(xiàn) S 型曲線，但本底較高的樣 品，應為陰性。