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主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA 試劑盒, ELISA檢測(cè)試劑盒, 生化試劑, 科研抗體, 常規(guī)生化試劑, 大鼠檢測(cè)試劑盒, 小鼠檢測(cè)試劑盒, 植物檢測(cè)試劑盒, 酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒, 昆蟲檢測(cè)試劑盒, 雞elisa檢測(cè)試劑
呼吸道多重PCR檢測(cè)試劑盒
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1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
產(chǎn)品名稱 | 呼吸道多重PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | |
貨號(hào) |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
使用方法:
呼吸道多重PCR檢測(cè)試劑盒注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書;陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子*很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
呼吸道多重PCR檢測(cè)試劑盒
蕓香葉苷
大鼠補(bǔ)體片斷*(C*)
磷脂酶D
苯甲氧羰酰琥珀酰亞胺
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶測(cè)試盒
大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)
人遲現(xiàn)抗原4(VLA4)
雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)
葡萄糖脫氫酶(GCDH)測(cè)試盒
人血管緊張肽酶A(ATA)
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)
植物鈣調(diào)素(CAM)
胞苷
人流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)
單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒
大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)
二胺氧化酶(DAO)測(cè)試盒
漆酶測(cè)試盒
大鼠脫氫表雄酮(DHEA)
人壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)
L-半胱氨酸鹽酸鹽一水物
人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)
酒石黃
人膽酸(CA)
人多功能蛋白聚糖(VS)
大鼠β-防御素(β-DF)
可溶性果膠(WSP)含量測(cè)試盒
松三糖一水物
人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)
無(wú)水甜菜堿
L-丙氨酸
人丁型肝炎IgG(HDV IgG)
寶石紅蛋白染色試劑
豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)
變色酸二鈉鹽
次甲基綠
人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)
人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體(ANNA-2/Ri)
人游離甲狀腺素(FT4)
雞白介素9(IL-9)
人層連蛋白/板層素(LN)
大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)
大鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)
大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)
甘油醛-3-磷酸脫氫酶
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)
甘氨酸鈣
1,6-二磷酸果糖一鈣鹽
BCA蛋白法含量測(cè)試盒
2′-氟脫氧胞苷
L-天門冬氨酸鈣
唾液乳糖
BOC-L-苯丙氨醇
二甲苯青FF
膽紅素氧化酶
DL-谷氨酸
硫氧還蛋白過(guò)氧化物酶(TPX)測(cè)試盒
大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)
大鼠促生長(zhǎng)釋放(GRH)
大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)
釕紅
丙酮酸脫羧酶
泰利霉素
人血小板活化因子(PAF)
細(xì)胞色素b5含量測(cè)試盒
胃粘膜素
人乙醇脫氫酶(ADH)
人周期素依賴性激酶5(CDK5)
植物赤霉素(GA)
人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)
布魯諾廣譜殺菌劑
十六烷基三甲基溴化銨