上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售小麥葉疫病菌PCR試劑盒現(xiàn)貨，

本試劑盒引物經(jīng)過優(yōu)化，反應(yīng)特異性強，即開即用，歡迎新老客戶咨詢訂購。，本試劑盒引物經(jīng)過優(yōu)化，反應(yīng)特異性強，即開即用，歡迎新老客戶咨詢訂購。

產(chǎn)品詳細信息

中文名稱：小麥葉疫病菌PCR試劑盒

英文名稱：Alternaria spp

產(chǎn)品規(guī)格：50T/盒

用途】用于小麥葉疫病菌的檢測、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過5次，有效期12個月。

提示：本品僅用于科研實驗，不能用作醫(yī)療及臨床診斷。

小麥葉疫病菌PCR試劑盒

適用儀器】

ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。
【保存和運輸】

上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過6個月，標本運送應(yīng)采用0℃冰壺。

【使用方法】

1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1 樣本前處理

組織：取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿，勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中；
液體標本：取適量標本13000rpm離心2min，棄上清。
1.2 DNA提取

1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液，100℃恒溫處理10分鐘，13,000 rpm離心5分鐘，取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2. 試劑配制（試劑準備區(qū)）

根據(jù)代檢測樣本總數(shù)，設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N（N=樣本數(shù)+1

管陰性對照+1管陽性對照），體系配制如下表：

試劑

WSSV 反應(yīng)液

酶液

用量（樣本數(shù)為N）

20μl

1μl

3. 加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟1提取的DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μl，加入相應(yīng)的

反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4. PCR擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1 將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量PCR儀反應(yīng)槽內(nèi)；

5. 結(jié)果分析判定

結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置基線（baseline）：一般情況下，對ABI 7500、7700等儀器設(shè)為6-15cycle，對PE5700設(shè)為3-15cycle,對MJ Research Option2設(shè)為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調(diào)整。
設(shè)置閾值（threshold）:以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線（無規(guī)則的噪音線）的zui高點。
結(jié)果判斷
陽性：檢測樣本Ct值小于等于35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長期；
可疑：檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0，重復(fù)一次實驗，如果Ct值仍小于40.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長期，為陽性，否則為陰性；
陰性：檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
6. 對檢驗結(jié)果的解析

實驗室環(huán)境污染，試劑污染，標本交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果。