十二指腸鉤口線蟲PCR試劑盒
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生產(chǎn)商,貿(mào)易商,
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上海市奉賢區(qū)
上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售十二指腸鉤口線蟲PCR試劑盒現(xiàn)貨,
本試劑盒引物經(jīng)過優(yōu)化,反應特異性強,即開即用,歡迎新老客戶咨詢訂購。,本試劑盒引物經(jīng)過優(yōu)化,反應特異性強,即開即用,歡迎新老客戶咨詢訂購。
產(chǎn)品詳細信息
中文名稱:十二指腸鉤口線蟲PCR試劑盒
英文名稱:Ancylostoma duodenale
產(chǎn)品規(guī)格:50T/盒
用途】用于十二指腸鉤口線蟲的檢測、診斷和流行病學調(diào)查。
【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數(shù)不超過5次,有效期12個月。
提示:本品僅用于科研實驗,不能用作醫(yī)療及臨床診斷。
十二指腸鉤口線蟲PCR試劑盒
適用儀器】
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。
【保存和運輸】
上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過6個月,標本運送應采用0℃冰壺。
【使用方法】
1. 樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1 樣本前處理
組織:取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿,勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中;
液體標本:取適量標本13000rpm離心2min,棄上清。
1.2 DNA提取
1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液,100℃恒溫處理10分鐘,13,000 rpm離心5分鐘,取上清液轉移至新的1.5ml EP管,-20℃保存;
2. 試劑配制(試劑準備區(qū))
根據(jù)代檢測樣本總數(shù),設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1
管陰性對照+1管陽性對照),體系配制如下表:
試劑
WSSV 反應液
酶液
用量(樣本數(shù)為N)
20μl
1μl
3. 加樣(樣本處理區(qū))
將步驟1提取的DNA、陽性質控品、陰性質控品各取4μl,加入相應的
反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
4. PCR擴增(核酸擴增區(qū))
4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內(nèi);
5. 結果分析判定
結果分析條件設定
設置基線(baseline):一般情況下,對ABI 7500、7700等儀器設為6-15cycle,對PE5700設為3-15cycle,對MJ Research Option2設為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調(diào)整。
設置閾值(threshold):以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線(無規(guī)則的噪音線)的zui高點。
結果判斷
陽性:檢測樣本Ct值小于等于35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長期;
可疑:檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0,重復一次實驗,如果Ct值仍小于40.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長期,為陽性,否則為陰性;
陰性:檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
6. 對檢驗結果的解析
實驗室環(huán)境污染,試劑污染,標本交叉污染會出現(xiàn)假陽性結果;試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果。