毛根農(nóng)桿菌PCR試劑盒
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上海滬崢生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
|
聯(lián)系方式
用途范圍 限科研
純度 詳詢(xún)客服%
產(chǎn)地 國(guó)內(nèi)
品牌 上海滬崢
規(guī)格 50T/盒
貨號(hào) HZT0422
是否進(jìn)口
商品介紹

上海滬崢專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)銷(xiāo)售毛根農(nóng)桿菌PCR試劑盒現(xiàn)貨,

本試劑盒引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,反應(yīng)特異性強(qiáng),即開(kāi)即用,歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu)。,本試劑盒引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,反應(yīng)特異性強(qiáng),即開(kāi)即用,歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu)。

產(chǎn)品詳細(xì)信息

中文名稱(chēng):毛根農(nóng)桿菌PCR試劑盒

英文名稱(chēng):Agrobacterium rhizogenes

產(chǎn)品規(guī)格:50T/盒

用途】用于毛根農(nóng)桿菌的檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò)5次,有效期12個(gè)月。

提示:本品僅用于科研實(shí)驗(yàn),不能用作醫(yī)療及臨床診斷。

毛根農(nóng)桿菌PCR試劑盒使用方法

操作步驟
1  病毒 RNA 的提取
1.1  取已處理的樣品、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照,分別加入裂解液 600 μL,充分顛倒混勻,室溫靜置 3~

5 min。

1.2  將液體吸入吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液體時(shí)盡量不要吸到懸浮雜質(zhì),以免離心時(shí) 堵塞吸附柱),13000 rpm 離心 30 s。

1.3  棄去收集管中液體,加入 600 μL 洗液,13000 rpm 離心 30 s。

1.4 重復(fù)步驟 1.3。

1.5 棄去收集管中液體,13000 rpm 空柱離心 2 min,以除去殘留的洗滌液。

1.6  將吸附柱移入新的 1.5 mL 離心管中,向柱中央加入洗脫液 50 μL,室溫靜置 1 min,13000 rpm

離心 30 s,離心管中液體即為模板 RNA。

2  實(shí)時(shí)熒光 RT-PCR 操作
設(shè)被檢樣品、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照總和為 N,則反應(yīng)體系配制如下: 試劑 體系


PCR 管中加入下列成分:

 

 

成份

 

 

樣品

 

 

陽(yáng)性對(duì)照

 

 

陰性對(duì)照

 

雙酶一管式 RT-PCR Buffer,

15 uL

15 uL

15 uL

EMCV 專(zhuān)一性引物對(duì)

2 uL

2 uL

2 uL

樣品 RNA

1-5 uL

無(wú)

2 uL

EMCV 陽(yáng)性對(duì)照

無(wú)

2 uL

無(wú)

補(bǔ)超純水到

28 uL

28 uL

無(wú)

MMLV-Taq Mix

2 uL

2 uL

2 uL

[1] 輕柔混勻后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。



結(jié)果判定
1 結(jié)果分析條件設(shè)定 閾值設(shè)定原則:閾值線(xiàn)設(shè)定于剛好超過(guò)陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線(xiàn)的點(diǎn)。不同儀器可根據(jù)儀器噪音

情況進(jìn)行調(diào)整。

2  結(jié)果描述及判定

陽(yáng)性對(duì)照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線(xiàn),陰性對(duì)照無(wú) Ct 值并且無(wú)特定擴(kuò)增曲線(xiàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果成 立;被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線(xiàn)為 AIV 陽(yáng)性;被檢樣品 30<Ct<37 并出現(xiàn)特定的擴(kuò) 增曲線(xiàn),需重新取樣提取 RNA,擴(kuò)增后進(jìn)行結(jié)果判定,如仍是可疑,可判定為陽(yáng)性;被檢樣品 Ct 值≥37 時(shí),超過(guò)本方法檢測(cè)靈敏度范圍,判定為陰性;對(duì)于某些未呈現(xiàn) S 型曲線(xiàn),但本底較高的樣 品,應(yīng)為陰性。

放線(xiàn)共生放線(xiàn)桿菌PCR試劑盒注意事項(xiàng)

所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;

試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,完全混勻并短暫離心;

反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專(zhuān)用工作服;

樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

實(shí)驗(yàn)完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;

試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理

 

 

 


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公司名稱(chēng) 上海滬崢生物科技有限公司
聯(lián)系賣(mài)家 李小姐 (QQ:869248833)
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