Ni-陶瓷/瓊脂糖凝膠是一種將螯合鎳鍵合在剛性陶瓷/瓊脂糖凝膠復合微球上形成的金屬離子螯合親和層析分離介質。該產品的基質采用“shellinagel”模式設計，剛性結構不可壓縮，耐壓，沉降快，易裝柱，且保留了天然多糖化合物極好的親水性及大網架結構，與生物活性大分子有很好的相容性；介質具有高動態(tài)吸附容量，快流速操作等特點，主要用于分離組氨酸標記（His-Tag）的基因工程蛋白質的分離純化。

二、理化性能指標：

三、產品使用方法：

1. 裝柱

1.1 根據分離目標性質配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。

1.2 將所取凝膠抽干，用初始緩沖液（按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例）配成勻漿并脫氣。

1.3 將層析柱垂直固定，底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。

1.4 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內，使凝膠在柱內自由沉降，水封層析柱，沉降1-2小時即可。

1.5 連結好柱子頂端活動柱頭，打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積，再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積，調節(jié)適配柱頭，使其盡量貼近膠面，最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

注意：所有操作過程不能引入氣泡，保證裝膠的均勻度。

2. 平衡

將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH等參數不變。平衡緩沖液根據目標物性質和pH要求可選擇Tris-鹽酸、PBS、檸檬酸-檸檬酸鈉、巴比妥、醋酸-醋酸鈉等緩沖液。

3. 上樣

切換轉換閥進行上樣，上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇，也可進行線性實驗找到最佳上樣量；樣品的預處理：用平衡液配制，0.45mm微孔濾膜過濾。

4. 沖洗

用2-3個柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH等參數不變，此時未吸附的組分被清洗出去。

5. 洗脫

Ni-陶瓷/瓊脂糖凝膠的洗脫可用咪唑溶液進行恒定洗脫、梯度洗脫或者階躍洗脫，一般推薦增大咪唑濃度的梯度洗脫進行。

6. 再生

用平衡緩沖液按操作流速沖洗3-5個柱體積。

若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

7. 在位清洗(CIP)

對于強結合蛋白質或脂類物質，首先采用0.05mol/LEDTA進行Ni²⁺的去除，接著可采用以下流程進行在位清洗：1mol/LNaOH洗2個柱體積，4mol/L尿素或3mol/L鹽酸胍洗2個柱體積，70%乙醇或30%異丙醇洗2個柱體積，平衡緩沖液洗2個柱體積。最后用0.1mol/L的硫酸鎳重新固定Ni²⁺。

在位清洗可有效去除介質上的雜質，同時介質上的熱源也可基本去除。

四、包裝、貯存、運輸、保質期：

1. 包裝：聚胺酯瓶密封包裝，規(guī)格為25毫升、100毫升、250毫升和1升。

2. 貯存：20%乙醇，4°C冰箱保存。

3. 運輸：4°C、常壓、避光。

4. 保質期：5-10年。