轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動子PCR試劑盒
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上海市奉賢區(qū)
產(chǎn)品名稱:轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動子PCR試劑盒
分類:pcr-熒光試劑盒
用途:本產(chǎn)品僅供科研與實驗使用,不用于臨床診斷等
目的:本試劑盒適用于檢測疑似感染者或發(fā)病動物等組織、體液或淋巴結(jié)等標本中禽流感病毒rna,用于禽流感病毒感染的輔助診斷,其檢測結(jié)果僅供參考。
轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動子PCR試劑盒 PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動子PCR試劑盒在PCR 管中加入下列成分:
成份 |
樣品 |
陽性對照 |
陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer, 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機,按下面參數(shù)進行 RT-PCR。
轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動子PCR試劑盒電泳檢測RT-PCR 產(chǎn)物。預期的PCR 產(chǎn)物長度為 286 bp。
轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動子PCR試劑盒◆ 注意事項
1.本試劑檢測靈敏度高。為了防止污染,實驗要分區(qū)操作。
1)*區(qū):樣本制備區(qū)。
2)*區(qū):模板添加區(qū)。
3)第三區(qū):擴增及產(chǎn)物分析區(qū)。
★ 分區(qū)之間*進行物理性隔離,避免人為因素造成的污染。
2.實驗過程中穿戴工作服和乳膠手套,不同區(qū)域獨立使用工具,需更換手套和實驗服。
3.嚴格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰盒上操作。
4.反應液中的成分對光敏感,應避光保存。試劑使用前要完全解凍,但應避免反復凍融,推薦使用前離心30秒,并按檢測頻次將反應液以適當體積分管保存。
5.反應結(jié)束后,擴增管請置于密封袋內(nèi)丟棄,當日清理,開蓋易造成氣溶膠污染,禁止開蓋。
6.不同批號試劑請勿混合使用,在有效期內(nèi)使用。